化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
NuSmart®核酸直接釋放試劑盒可為植物樣本加持 ——告別液氮
閱讀：343 發(fā)布時(shí)間：2024-7-8NuSmart®核酸直接釋放試劑盒可為植物樣本加持
——告別液氮
植物樣本的傳統(tǒng)提取DNA或RNA之前都需要對(duì)樣本進(jìn)行液氮研磨破壞細(xì)胞壁，這樣做的好處有以下幾點(diǎn)：
1,、植物細(xì)胞具有堅(jiān)固的細(xì)胞壁，特別是纖維素和木質(zhì)素等成分,，使用液氮研磨可以有效地破壞這些細(xì)胞結(jié)構(gòu),，使得細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA更容易釋放；
2,、低溫環(huán)境有助于減少核酸酶的活性,，提高核酸的提取質(zhì)量和產(chǎn)量；
3,、使樣本均勻破碎,，增加提取試劑與核酸的接觸面積，提高核酸提取的效率,；
4,、對(duì)于長(zhǎng)片段研究時(shí),，更能保持完整性,；
看來液氮研磨是bi不可少的步驟，但是一旦樣本量成百上千,，液氮研磨就成為繁瑣的限速步驟,，而且液氮的溫度低至-196℃，使用過程中極易誤傷,，對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員安全意識(shí)要求很高,。總結(jié)發(fā)現(xiàn)使用液氮有以下幾個(gè)缺點(diǎn)：
1,、溫度極低,，使用過程中需要佩戴手套和護(hù)目鏡；
2,、起始樣本量大一些,，避免研磨過程中損失；
3,、無法高通量操作,；
4、無法自動(dòng)化操作,；
5,、操作需謹(jǐn)慎，導(dǎo)致提取DNA時(shí)間延長(zhǎng)數(shù)倍,；
那怎么辦呢,？NuSmart®核酸直接釋放試劑盒來助力，試劑盒中PL-DNA Lysis和葉片混合后，55℃反應(yīng)5分鐘,，DNA模板就制備好了,，操作流程見下圖。整個(gè)操作流程非常簡(jiǎn)單,，wan全不用擔(dān)心液氮使用問題,，也不用擔(dān)心一天的效率太低，提高整個(gè)工作效率,。
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是什么?劃重點(diǎn)來了——
√對(duì)于小量和微量樣本十分友好
√操作簡(jiǎn)單,，無需訓(xùn)練
√基因組完整性好
√無酶、無有機(jī)試劑
√無大型設(shè)備投入
總結(jié)來說,，NuSmart®核酸直接釋放試劑盒中不含有任何有毒,、易燃、易爆成分,，甚至無需佩戴手套即可取用,。
樣本量低對(duì)于分子生物實(shí)驗(yàn)室科研人員來說一直都是一個(gè)痛點(diǎn)，例如☆法醫(yī)鑒定的拭子含量都是微量
☆待分類細(xì)菌沒有合適的培養(yǎng)基培養(yǎng),，產(chǎn)量很低
☆流式分選后細(xì)胞很少很少
之所以是痛點(diǎn),，主要是因?yàn)榘凑諏?shí)驗(yàn)室常用核酸提取方法只有離心柱提取法或者磁珠提取法，這些方法都需要大量樣本支持,。例如30mg組織,、106個(gè)細(xì)胞、100mg水稻葉片,、1mL血液等等,。這些條件成為下游實(shí)驗(yàn)的限速因素。庫思擇開發(fā)的NuSmart®核酸直接釋放試劑盒對(duì)微量樣本非常友好,，甚至一個(gè)細(xì)胞不在話下,。參考下圖，使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus對(duì)一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行處理后,，可以有效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)4kb的基因,。
使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus（貨號(hào)Nu-C01）處理1個(gè)Sp2/0細(xì)胞，使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增不同長(zhǎng)度基因（分別0.5kb,、1kb,、2kb、3kb,、4kb）,。
總結(jié)來說無論樣本多少，只要有完整結(jié)構(gòu),、有核酸NuSmart®試劑盒都能夠解決,。
目前可以使用的樣本參考如下：
來源 | 范圍 |
細(xì)胞 | 293T,、A549、Vero,、PK15,、Sp2/0、HCT-116,、Marc145,、ST、siHa,、MCF-7 |
人 | 頭發(fā),、唾液、咽拭子,、全血,、精液、腫瘤切片 |
小鼠 | 心,、肝,、脾、肺,、腎,、腦、脊柱,、胃,、大腸、小腸,、膽囊、尾巴,、腳趾,、皮、耳朵,、肌肉,、EDAT 抗凝血、肝素鈉抗凝血,、枸櫞酸鈉抗凝血 |
豬/雞/羊 | 心,、肝、脾,、肺,、腎、淋巴結(jié),、精液,、全血、血清 |
亞洲鯽魚 | 魚鰭、魚泡,、魚鱗,、魚籽 |
病毒 | ASFV、PRV,、PPV,、PCV |
細(xì)菌 | 金黃色葡萄球菌、大腸桿菌,、農(nóng)桿菌,、結(jié)核桿菌、糞腸球菌,、鏈球菌 |
真菌 | 酵母菌,、曲霉菌、犬小孢子菌,、口蘑,、平菇、白木耳 |
植物
| 煙草,、擬南芥,、油菜、水稻,、大豆,、玉米、小麥,、棉花,、百脈根、西紅柿,、土豆,、茄子、胡蘿卜,、龍眼,、荔枝、蘋果,、香蕉,、葡萄 |
中草藥 | 鐵皮石斛、丹參,、益母草,、紅花、紫草,、苦參,、艾葉,、靈芝、麥冬,、金銀花,、淫羊藿、茯苓,、蒼術(shù),、白術(shù)、百合,、半夏 |
其他微生物 | 支原體,、衣原體、螨蟲,、跳蟲 |