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NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)在血液中應(yīng)用中的應(yīng)用和表現(xiàn)

NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)能夠在不使用機(jī)械力,、蛋白酶K、氯仿/無(wú)水乙醇的條件下,，通過(guò)破壞細(xì)胞壁和/或細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)釋放細(xì)胞內(nèi)物質(zhì),，進(jìn)一步破壞細(xì)胞核膜結(jié)構(gòu)，從而達(dá)到從全血或抗凝血中釋放核酸DNA的目的,。整個(gè)步驟如下圖：

 

使用NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù),，只需要10μL甚至更少的抗凝血就能夠釋放出全部的基因組DNA。而抗凝血中釋放的抑制物從不同程度降低PCR的靈敏度和準(zhǔn)確性,。不同的抗凝劑成分對(duì)PCR擴(kuò)增也有強(qiáng)抑制,，為了解決這一問(wèn)題，NuSmart^®血液PCR試劑盒添加有納米物質(zhì)吸附抑制物,，以幫助下游PCR,、qPCR、LAMP,、RPA,、STR等順利完成。

當(dāng)檢測(cè)量逐年遞增,，實(shí)驗(yàn)室常用的提取方法不足以滿足臨床篩選需要,，NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生，能夠解決低樣本量,，高檢測(cè)通量的問(wèn)題,。而且整個(gè)過(guò)程不使用蛋白酶K，不使用有毒有害有機(jī)試劑,，無(wú)需配備高額設(shè)備即可完成,。

—對(duì)樣本量要求低

—操作簡(jiǎn)單快速

—室溫可處理

—不用液氮研磨

—不用離心

—不使用蛋白酶和有機(jī)試劑

 

 

案例 經(jīng)過(guò)處理的小鼠EDTA血和枸櫞酸鈉血擴(kuò)增10對(duì)引物

 

 

1：小鼠EDTA血  2 小鼠枸櫞酸鈉血 +：柱提基因組陽(yáng)性對(duì)照 -：陰性對(duì)照

使用NuSmart^®血液 PCR 試劑盒（貨號(hào)Nu-B01）處理小鼠EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血，使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增分別擴(kuò)增10對(duì)引物。