本試劑盒適用于真菌（例如酵母,、霉菌、擔(dān)子菌）,、細(xì)菌,、病毒等微生物擴(kuò)增。無(wú)需研磨,，無(wú)需酶

類消化處理,，無(wú)需經(jīng)過(guò)硅膠膜或磁珠提取純化，只需要將樣本放入專用裂解液中,，保證基因組完整

性,。操作簡(jiǎn)，只需要10-15 分鐘即可將裂解物產(chǎn)物作為擴(kuò)增模板,，加入到2× MIC Smart Mix 中,。2× MIC

Smart Mix 包含修飾的DNA 聚合酶，相較于普通PCR,，具有更高的保真度和更高的產(chǎn)量,。PCR 產(chǎn)物

的3’含有A 末端，可直接克隆到T 載體,。

本試劑盒僅供研究使用,，不可用于臨床、食品,、化妝品等領(lǐng)域,。

試劑盒組成

保存條件

-20oC 保存,。

MIC Buffer 和2× MIC Smart Mix 長(zhǎng)期使用可放在4℃,，避免反復(fù)凍融。

需要準(zhǔn)備

金屬恒溫浴,、PCR 儀

使用方法

一,、不同樣品的處理方法

1. 酵母菌/細(xì)菌/病毒/霉菌等培養(yǎng)液

（1）取10μL 培養(yǎng)液和20μL MIC Buffer 充分混勻。

（2）置于55℃作用5 分鐘,，溶液即為DNA 模板,。

2. 酵母菌/細(xì)菌/霉菌菌落

（1）挑取單菌落置于500μL 生理鹽水中，渦旋混勻,。

（2）加入20 μL MIC Buffer,，充分混勻,。

（3）置于55℃作用5 分鐘，溶液即為DNA 模板,。

3. 蘑菇類或者組織

（1）方法一：剪取1-4mm 菌蓋或者組織,，加入20μL MIC Buffer 充分混勻。

方法二：綠豆大小菌蓋或者組織塊放入組織勻漿器中研磨1-2 分鐘,。取10-20μL 與20μL MIC

Buffer 充分混勻,。

（2）置于55℃作用5 分鐘，溶液即為DNA 模板,。

二,、推薦PCR 反應(yīng)體系

三、按照以下方法設(shè)定PCR 反應(yīng)

注意事項(xiàng)

一,、試劑盒使用前注意事項(xiàng)

（1）所有試劑應(yīng)按照溫度儲(chǔ)存,。請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

（2）使用前后均需要對(duì)操作區(qū)進(jìn)行消毒,，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等,。耗材均

需使用商品化的無(wú)酶耗材。

（3）2× MIC Smart Mix 頻繁使用,，可在4℃保存,。長(zhǎng)期不使用可放-20℃保存。

二,、試劑盒使用過(guò)程中注意事項(xiàng)

（1）PCR 過(guò)程中推薦使用陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照,。

（2）整個(gè)過(guò)程中使用的吸頭、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,，減

少環(huán)境污染,。

（3）2× MIC Smart Mix 包含染料，可在反應(yīng)結(jié)束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,。

（4）為防止試劑盒污染,，請(qǐng)勿將不同批號(hào)試劑盒混用。