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技術文章

NuSmart廣譜型DNA免核酸提取試劑 M-DNA01產(chǎn)品更新

閱讀:743          發(fā)布時間:2023-2-22

試劑盒應用


本試劑盒中采用配方,,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,,無需反復離心,,通過裂解和吸附獲得高質(zhì)量的基因組DNA,。該DNA 無需進行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR,、LAMP,、STR等擴增。

NuSmart® DNA Lysis 可用于血樣,、唾液,、腹水、細胞,、組織,、拭子、DNA 病毒,、大腸桿菌,、農(nóng)桿菌、葡萄球菌,、環(huán)境樣本(例如擦拭物,、水樣本,、鞋底)、支原體,、衣原體以及植物等樣品中基因組DNA的提取,。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床,、食品,、化妝品等領域。

試劑盒組成

保存條件

4oC 保存,。使用前將NuSmart® DNA Lysis 充分混勻,。

需要準備

金屬恒溫浴、離心機

使用方法

一,、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

(1)組織液包括組織研磨液,、細胞懸液、血清,、血液,、唾液、尿液,、精液,、拭子處理液※等。取10 μL組織液置于離心管中,。

※:棉簽放入500μL生理鹽水或無菌水中,,浸泡5-10min,用力擠壓后取10 μL置于離心管中,。

(2)加入20 μL DNA Lysis,。

(3)充分混勻。

(4)置于55oC 加熱5 分鐘,。溶液即為DNA 模板,。

2. 組織塊的處理

(1)用眼科剪剪取1-2mm 組織塊,并將組織塊剪成肉泥狀,。

(2)加入20 μL DNA Lysis,。

(3)充分混勻。

(4)置于55oC 加熱5分鐘,。

(5)10,000rpm 離心2-3 分鐘,,取上清。上清即為DNA 模板,。

3. 其他樣本的處理

(1)菌類包括大腸桿菌,、農(nóng)桿菌、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在離心管中,。

(2)用接種針/無菌牙簽挑取菌斑或10μL 培養(yǎng)溶液放入(1)中,。

(3)充分混勻,。

(4)置于55oC 加熱5 分鐘,。溶液即為DNA 模板。

4. DNA 病毒的處理

(1)細胞培養(yǎng)液參考“組織液的處理",。

(2)組織樣本參考“組織塊的處理",。

5. 植物樣本的處理

(1)葉片參考“組織塊的處理"。

(2)種子需磨碎后參考“組織塊的處理",。

二,、推薦PCR 反應體系

注意事項

一、試劑盒使用前注意事項

(1)所有試劑按照溫度儲存,。

(2)實驗前后務必對操作區(qū)進行消毒,,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材需使用商品化的無酶耗材,。

(3)DNA Lysis 采用配方,,若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬于正常現(xiàn)象,。

二,、試劑盒使用過程中注意事項

(1)PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。

(2)整個過程中使用的吸頭,、離心管等耗材應丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,,減少環(huán)境污染。

三,、試劑盒使用后注意事項

(1)DNA Lysis 處理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 個月,。避免反復凍融,防止基因組斷裂,。

(2)PCR 反應完成后,,嚴禁在實驗區(qū)開蓋。在污染區(qū)進行瓊脂糖電泳,,以防止氣溶膠污染,。

(3)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用,。

檢測實例

來源 范圍

細胞 293T,、A549、Vero,、PK15,、Sp2/0、HCT-116,、Marc145,、ST,、siHa、MCF-7

人 頭發(fā),、唾液,、咽拭子、全血

小鼠 心,、肝,、脾、肺,、腎,、腦、脊柱,、胃,、大腸、小腸,、膽囊,、尾巴、腳趾,、皮,、耳朵、肌肉,、EDAT 抗凝血,、肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉抗凝血

豬 心,、肝,、脾、肺,、腎,、淋巴結、精液,、全血,、血清

雞 胃、肝,、心,、肺、脾

病毒 ASFV,、PRV,、PPV、PCV

細菌 金黃色葡萄球菌、大腸桿菌,、農(nóng)桿菌,、結核桿菌

真菌 酵母菌、白木耳,、靈芝

植物 煙草,、擬南芥、油菜,、水稻,、大豆,、玉米,、小麥、棉花,、百脈根,、西紅柿、土豆,、茄子,、胡蘿卜、龍眼,、荔枝,、蘋果、香蕉,、葡萄,、鐵皮石斛、丹參,、益母草,、紅花、紫草,、苦參,、艾葉

亞洲 鯽魚魚鰭、魚泡,、魚鱗,、魚籽

其他物種 支原體、衣原體



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