試劑盒應(yīng)用

本試劑盒適用于小鼠基因克隆,，轉(zhuǎn)基因小鼠,、基因敲除小鼠的快速PCR 鑒定,。

結(jié)合Nu-Smart®平臺(tái)升級(jí)Mu-DNA 配方，5 分鐘內(nèi)裂解鼠尾,、耳朵,、腳趾。使用過程中無需大體積樣本,、無需反復(fù)離心,，從而獲得高質(zhì)量的DNA 模板,。

試劑盒中2× EZ TaqMix(With Dye),，包含有聚合酶、dNTPs 和優(yōu)化的緩沖體系,，PCR 過程中只需加入引物和模板DNA 進(jìn)行擴(kuò)增,，減少開蓋/移液等操作，減少交叉污染,。該體系中添加有電泳緩沖液和染料,，PCR 結(jié)束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，使用方便快捷,。

本試劑盒僅供研究使用,，不可用于臨床、食品,、化妝品等領(lǐng)域,。

試劑盒組成

保存條件

-20oC 保存。

Mu-DNA 和2×EZ TaqMix(With Dye),，經(jīng)常使用可4℃保存,，避免反復(fù)凍融。

需要準(zhǔn)備

金屬恒溫浴,、離心機(jī),、PCR 儀

使用方法

1. 樣品處理

（1）用眼科剪剪取1-2mm 的鼠尾、耳朵、腳趾,。

（2）加入20 μL Mu-DNA,。

（3）充分混勻。

（4）置于55℃作用5 分鐘,。

（5）10,000 轉(zhuǎn)離心60 秒取上清,。上清即為DNA 模板。

2. 推薦如下反應(yīng)體系

3. 按照以下方法設(shè)定PCR 反應(yīng)

注意事項(xiàng)

一,、試劑盒使用前注意事項(xiàng)

（1）所有試劑應(yīng)按照溫度儲(chǔ)存,。請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

（2）使用前后均需要對(duì)操作區(qū)進(jìn)行消毒,，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等,。耗材均需使用商品化的無酶耗材。

（3）Mu-DNA 頻繁使用,，可在4℃保存,。長期不使用可放-20℃保存。

二,、樣本注意事項(xiàng)

（1）不同組織使用不同的眼科剪進(jìn)行處理,，防止交叉污染導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差。

（2）組織剪取量不宜過大,，1-2mm 最佳,。

三、試劑盒使用過程中注意事項(xiàng)

（1）PCR 過程中推薦使用陰性對(duì)照和陽性對(duì)照,。

（2）整個(gè)過程中使用的吸頭,、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中，減少環(huán)境污染,。

（3）2×EZ TaqMix(With Dye)包含染料,，可在PCR 反應(yīng)結(jié)束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。

四,、試劑盒使用后注意事項(xiàng)

（1）Mu-DNA 處理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 個(gè)月,。避免反復(fù)凍融，防止基因組斷裂,。

（2）PCR 反應(yīng)完成后,，嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)區(qū)開蓋。應(yīng)在污染區(qū)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,，防止氣溶膠污染,。

（3）為防止試劑盒污染，請(qǐng)勿將不同批號(hào)試劑盒混用,。

常見問題解析

問題可能原因推薦解決方案