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技術(shù)文章

廣譜型DNA免核酸提取試劑M-DNA01的使用方法

閱讀:604          發(fā)布時(shí)間:2023-2-9

產(chǎn)品貨號:M-DNA01

產(chǎn)品名稱:廣譜型DNA免核酸提取試劑

產(chǎn)品規(guī)格:1ml 50T

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒中配方,,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,,無需反復(fù)離心,通過裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA,。該DNA無需進(jìn)行純化可以直接用于PCR,、熒光定量PCR、Lamp等擴(kuò)增,。

DNA-Lysis可用于全血、血清,、唾液、腹水,、細(xì)胞、組織(例如淋巴結(jié),、脾臟、腎臟,、扁桃體、肺,、肌肉等),、拭子(例如血拭子、咽拭子),、鼠尾、病毒,、革蘭氏陽性菌,、大腸桿菌、葡萄球菌以及環(huán)境樣本(例如擦拭物,、水樣本、鞋底)等樣品中基因組DNA的提取,。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床,、食品,、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

組分

M-DNA01

DNA-Lysis

1 mL

保存條件

4oC保存,。使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻(若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬正常現(xiàn)象),。

需要準(zhǔn)備

金屬恒溫浴,、離心機(jī)

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

(1)組織液包括組織研磨液,、傳代細(xì)胞懸液,、血清、唾液,、尿液等,。取20 μL組織液置于離心管中。

(2)取10 μL(1)中組織液,,加入20 μL DNA-Lysis,。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘,。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清,。

注意:組織液為血液樣品時(shí),,提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時(shí),,需要將提取物按照1:40稀釋,。例如5μL 提取物加入195μL中。

2. 組織塊的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。

(2)用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),,并將組織塊剪成肉泥狀,放在(1)中溶液中,。

(3)混勻,。

(4)置于55oC加熱5分鐘,。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清。

3. 菌類的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。

(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中,。如果是培養(yǎng)液,,取20μL放在(1)中溶液中。

(3)混勻,。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清,。

二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應(yīng)體系

注意事項(xiàng)

(1)在進(jìn)行大量樣品檢測時(shí),,可將本試劑盒的試劑預(yù)分裝到8聯(lián)PCR管,用多通道移液器進(jìn)行多樣本的處理,。

(2)取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中,濃度不宜過高或過低,,處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜,。擴(kuò)增細(xì)胞DNA時(shí),,取2000個(gè)細(xì)胞以內(nèi)即可;擴(kuò)增病毒基因時(shí)需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細(xì)胞數(shù)量,。

(3)樣品處理過程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染,,推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過程,以檢測環(huán)境的污染,。

(4)PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預(yù)測Tm值減去5℃,或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度,。

(5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個(gè)月,。

(6)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。



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