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技術(shù)文章

廣譜型DNA免核酸提取試劑廣譜型DNA免核酸提取試劑的使用方法

閱讀:486          發(fā)布時間:2022-10-31

產(chǎn)品摘要:廣譜型DNA免核酸提取試劑

產(chǎn)品貨號:M-DNA01

產(chǎn)品名稱:廣譜型DNA免核酸提取試劑

產(chǎn)品規(guī)格:1ml 50T

試劑盒應用

本試劑盒中采用配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需反復離心,通過裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA無需進行純化可以直接用于PCR,、熒光定量PCR、Lamp等擴增,。

DNA-Lysis可用于全血,、血清、唾液,、腹水、細胞,、組織(例如淋巴結(jié),、脾臟、腎臟,、扁桃體,、肺、肌肉等),、拭子(例如血拭子,、咽拭子)、鼠尾,、病毒,、革蘭氏陽性菌、大腸桿菌,、葡萄球菌以及環(huán)境樣本(例如擦拭物,、水樣本、鞋底)等樣品中基因組DNA的提取,。

本試劑盒僅供研究使用,,不可用于臨床、食品,、化妝品等領(lǐng)域,。

試劑盒組成

組分

M-DNA01

DNA-Lysis

1 mL

保存條件

4oC保存,。使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻(若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬正常現(xiàn)象),。

需要準備

金屬恒溫浴,、離心機

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

(1)組織液包括組織研磨液,、傳代細胞懸液,、血清、唾液,、尿液等,。取20 μL組織液置于離心管中。

(2)取10 μL(1)中組織液,,加入20 μL DNA-Lysis,。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘,。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清。

注意:組織液為血液樣品時,,提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時,,需要將提取物按照1:40稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中,。

2. 組織塊的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。

(2)用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),并將組織塊剪成肉泥狀,,放在(1)中溶液中,。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘,。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清。

3. 菌類的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。

(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,,放在(1)中溶液中。如果是培養(yǎng)液,,取20μL放在(1)中溶液中,。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘,。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清。

二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應體系

注意事項

(1)在進行大量樣品檢測時,,可將本試劑盒的試劑預分裝到8聯(lián)PCR管,,用多通道移液器進行多樣本的處理。

(2)取樣的細胞量應當適中,,濃度不宜過高或過低,,處理后溶液應當以透明為宜。擴增細胞DNA時,,取2000個細胞以內(nèi)即可,;擴增病毒基因時需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細胞數(shù)量。

(3)樣品處理過程中應當防止交叉污染,,推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過程,,以檢測環(huán)境的污染。

(4)PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預測Tm值減去5℃,,或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度,。

(5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個月。

(6)為防止試劑盒污染,,請勿將不同批號試劑盒混用


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