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廣譜型DNA免核酸提取試劑介紹-M-DNA01
閱讀：852 發(fā)布時間：2021-12-23品牌：Labchant
產(chǎn)品貨號：M-DNA01
產(chǎn)品名稱：廣譜型DNA免核酸提取試劑
產(chǎn)品規(guī)格：1ml 50T
試劑盒應(yīng)用
本試劑盒中采用*配方，能夠快速的裂解各種常見樣本,，無需反復(fù)離心，通過裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA,。該DNA無需進行純化可以直接用于PCR,、熒光定量PCR、Lamp等擴增,。
DNA-Lysis可用于全血,、血清、唾液,、腹水,、細(xì)胞、組織（例如淋巴結(jié),、脾臟,、腎臟、扁桃體,、肺、肌肉等）,、拭子（例如血拭子,、咽拭子）、鼠尾,、病毒,、革蘭氏陽性菌、大腸桿菌,、葡萄球菌以及環(huán)境樣本（例如擦拭物,、水樣本、鞋底）等樣品中基因組DNA的提取,。
本試劑盒僅供研究使用,，不可用于臨床,、食品、化妝品等域,。
試劑盒組成
組分 | M-DNA01 |
DNA-Lysis | 1 mL |
保存條件
4oC保存,。使用將DNA-Lysis室溫充分混勻（若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬正常現(xiàn)象）,。
需要準(zhǔn)備
金屬恒溫浴,、離心機
使用方法
一、不同樣品的處理方法
1. 組織液的處理
（1）組織液包括組織研磨液,、傳代細(xì)胞懸液,、血清、唾液,、尿液等,。取20 μL組織液置于離心管中。
（2）取10 μL（1）中組織液,，加入20 μL DNA-Lysis,。
（3）混勻。
（4）置于55oC加熱5分鐘,。
（5）12000rpm離心2-3分鐘,，取上清。
注意：組織液為血液樣品時,，提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時,，需要將提取物按照1：40稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中,。
2. 組織塊的處理
（1）取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。
（2）用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊（< 3 mm3），并將組織塊剪成肉泥狀,，放在（1）中溶液中,。
（3）混勻。
（4）置于55oC加熱5分鐘,。
（5）12000rpm離心2-3分鐘,，取上清。
3. 菌類的處理
（1）取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。
（2）用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,，放在（1）中溶液中。如果是培養(yǎng)液,，取20μL放在（1）中溶液中,。
（3）混勻。
（4）置于55oC加熱5分鐘。
（5）12000rpm離心2-3分鐘,，取上清,。
二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應(yīng)體系
20 μL體系（推薦） | |
2×TaqMix(With Dye) | 10 μL |
Forward Primer (10 μM) | 1 μL |
Reverse Primer (10 μM) | 1 μL |
Template DNA | 3 μL |
ddH2O | 5 μL |
注意事項
（1）在進行大量樣品檢測時,，可將本試劑盒的試劑預(yù)分裝到8聯(lián)PCR管,，用多通道移液器進行多樣本的處理。
（2）取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中,，濃度不宜過高或過低,，處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜。擴增細(xì)胞DNA時,，取2000個細(xì)胞以內(nèi)即可,；擴增病毒基因時需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細(xì)胞數(shù)量。
（3）樣品處理過程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染,，推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過程,，以檢測環(huán)境的污染。
（4）PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預(yù)測Tm值減去5℃,，或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度,。
（5）用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個月。
（6）為防止試劑盒污染,，請勿將不同批號試劑盒混用,。
原創(chuàng)作者：上海創(chuàng)凌生物科技有限公司