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廣譜型DNA免核酸提取試劑
閱讀:997 發(fā)布時間:2021-11-16廣譜型DNA 免核酸提取試劑
貨號:M-DNA01
試劑盒應(yīng)用
本試劑盒中采用*配方,,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,,無需反復(fù)離心,通過裂解和吸附獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA 無需進(jìn)行純化可以直接用于PCR,、熒光定量PCR,、STR 等擴增。DNA Lysis 可用于血樣,、唾液,、腹水、細(xì)胞,、組織(例如淋巴結(jié),、脾臟、腎臟,、肺,、肌肉、脊椎,、皮膚,、尾巴、耳朵等),、拭子(例如血拭子,、咽拭子)、DNA 病毒,、大腸桿菌,、農(nóng)桿菌、葡萄球菌,、環(huán)境樣本(例如擦拭物,、水樣本、鞋底),、支原體,、衣原體以及植物等樣品中基因組DNA 的提取。
本試劑盒僅供研究使用,,不可用于臨床,、食品、化妝品等領(lǐng)域,。
試劑盒組成
組分M-DNA0101(50T) M-DNA0102(250T)
DNA Lysis 1 mL 5 mL
保存條件 4oC 保存,。使用前將DNA Lysis 室溫充分混勻。
需要準(zhǔn)備 金屬恒溫浴,、離心機
廣譜型DNA 免核酸提取試劑使用方法
一,、不同樣品的處理方法
1. 組織液的處理
(1)組織液包括組織研磨液、細(xì)胞懸液,、血清,、血液,、唾液、尿液,、拭子處理液※等,。取10 μL組織液置于離心管中。
※:棉簽放入500μL生理鹽水或無菌水中,,浸泡5-10min,,用力擠壓后溶液取10 μL置于離心管中。
(2)加入20 μL DNA Lysis,。
(3)充分混勻,。
(4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板,。
2. 組織塊的處理
(1)用眼科剪剪取1-2mm 組織塊,,并將組織塊剪成肉泥狀。
(2)加入20 μL DNA Lysis,。
(3)充分混勻,。
(4)置于55oC 加熱5 分鐘。
(5)10000rpm 離心2-3 分鐘,,取上清,。上清即為DNA 模板。
3. 其他樣本的處理
(1)菌類包括大腸桿菌,、農(nóng)桿菌,、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在離心管中,。
(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中,。如果是培養(yǎng)液,,取10μL 放在(1)中溶液中。
(3)充分混勻,。
(4)置于55oC 加熱5 分鐘,。溶液即為DNA 模板。
4. DNA 病毒的處理
(1)細(xì)胞懸液參考“組織液的處理",。
(2)病料組織參考“組織塊的處理",。
5. 植物樣品的處理
(1)參考“組織塊的處理"。
二,、推薦PCR 反應(yīng)體系
注意事項
一,、試劑盒使用前注意事項
(1)所有試劑應(yīng)按照溫度儲存。請勿反復(fù)凍融,。
(2)檢測前后均需要對操作區(qū)進(jìn)行消毒,,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等,。耗材均
需使用商品化的無酶耗材。
(3)DNA Lysis 采用配方,,若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬于正?,F(xiàn)象。
二,、試劑盒使用過程中注意事項
(1)PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照,。
(2)整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,,防止形成環(huán)境污染,。
三、試劑盒使用后注意事項
(1)DNA Lysis 處理后的DNA 模板(除血樣)可在-20℃保存至少1 個月,。避免反復(fù)凍融,,防止基因組斷裂。
(2)PCR 反應(yīng)完成后,,嚴(yán)禁在實驗區(qū)開蓋,,在污染區(qū)進(jìn)行瓊脂糖電泳,以防止氣溶膠污染,。為防止試劑盒污染,,請勿將不同批號試劑盒混用。
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