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描述

在研究和診斷中,，PCR是一種檢測DNA是否存在的敏感方法,。PCR中使用的聚合酶經(jīng)常被E.coli DNA污染。當(dāng)檢測少量細(xì)菌DNA時,，污染的DNA可能導(dǎo)致靈敏度降低和假陽性,。其他污染源可能是dNTPs、緩沖體系,、引物/探針,，以及操作過程中引入的DNA污染。一般來說,，對細(xì)菌的檢測和分型采用16S或23S rDNA基因保守區(qū)段為靶點的廣譜范圍探針,。該方法對細(xì)菌DNA污染非常敏感，而大多數(shù)Master mix和聚合酶中都發(fā)現(xiàn)細(xì)菌DNA的痕跡,。當(dāng)使用qPCR檢測或定量少量的細(xì)菌DNA時,，污染的E.coli DNA可能會導(dǎo)致假陽性結(jié)果。

 

為了解決這個問題,，我們開發(fā)出PCR去污染試劑盒,，既能去除Master mix中細(xì)菌DNA污染，又不影響PCR反應(yīng)的靈敏度,。此外,，該試劑盒無RNase活性。

優(yōu)勢    

 1. 減少背景污染,，提高目標(biāo)基因檢測下限,；
     2. 不影響PCR檢測靈敏度；
     3. 簡單易用,，操作方便,。

 應(yīng)用   1. 去除PCR及RT-PCR的mastermix中E.coli內(nèi)源DNA污染及其他DNA污染；
   2. 用于終點PCR和探針依賴的qPCR,；
   3. 用于細(xì)菌檢測及基因分型,；
   4. 用于古細(xì)菌DNA檢測。

組分及特性

dsDNase：雙鏈特異性DNA酶,，去除Master mix,、引物及探針等的污染DNA,；

DTT：60℃條件下，能夠不可逆滅活dsDNase,，確保模板DNA不被清除,。
不降低反應(yīng)靈敏度   DNA污染是高靈敏度應(yīng)用面對的主要問題。這些應(yīng)用,，以低豐度DNA為目標(biāo)檢測基因,，極易受到污染DNA的干擾,。因此,，任何影響PCR靈敏度的去除DNA污染的方法，都是不能使用的,。

Figure 2. 用PCR去污染試劑盒處理/未處理的mastermix,、5個10倍梯度稀釋的gDNA和水（NTC）為模板進(jìn)行qPCR檢測。與NTC untreated組相比,，NTC decontaminated組在45個cycle仍然沒有信號,，說明PCR去污染試劑盒能程度去除mastermix中的污染。PCR去污染試劑盒處理前/后數(shù)據(jù)相比,，Cq值并沒有明顯改變,，說明基本不影響反應(yīng)靈敏度。

訂購信息

 

     ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,，總部位于挪威,。致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶，用于分子研究,、體外診斷和治療領(lǐng)域,。

    上海創(chuàng)凌生物科技有限公司，聚焦細(xì)胞治療,、基因治療,、類器官研究、mNGS病原微生物檢測等領(lǐng)域,，是ArcticZymes Technologies的中國代理,。