在人類心臟急性心肌梗死后,，數(shù)百萬個心肌細(xì)胞丟失并被纖維化疤痕所取代,。雖然這種纖維化疤痕對于維持心臟的結(jié)構(gòu)完整性是必要的，但它的存在與收縮質(zhì)量的減少相結(jié)合,，最終會導(dǎo)致心力衰竭,。仍然迫切需要開發(fā)治療策略來替代丟失的心臟組織。非哺乳動物脊椎動物生物,，如硬骨斑馬魚,，具有在多種類型損傷后再生丟失的心肌細(xì)胞的能力。值得注意的是，斑馬魚可以在冷凍損傷后再生心臟,，冷凍損傷是一種損傷模型,，其中放置在心臟上的液氮冷卻探針會導(dǎo)致細(xì)胞死亡、炎癥反應(yīng)的激活和含有纖維化膠原蛋白的疤痕沉積,，類似于人類心臟中的心肌梗塞,。雖然過去二十年的研究工作使我們對心臟再生機制的了解大大增加，但目前尚不清楚傷口邊界的再生心肌細(xì)胞如何侵入并最終取代受傷后含有膠原蛋白的疤痕組織,。

通過對斑馬魚心臟再生過程中心肌細(xì)胞突出到受傷組織中的深入分析,。我們表明，傷口邊界的心肌細(xì)胞表現(xiàn)出遷移細(xì)胞的特征,，包括運動絲狀偽足樣延伸到受傷組織中,，以及調(diào)節(jié)肌動蛋白動力學(xué)、粘著斑和 ECM 重塑的基因表達(dá)程序的上調(diào),。此外,，我們表明巨噬細(xì)胞在邊界區(qū)起著重塑 ECM 和促進心肌細(xì)胞突出的重要作用。然后我們表明 Mmp14b 是巨噬細(xì)胞存在和邊界區(qū) ECM 重塑的重要調(diào)節(jié)因子,，隨后心肌細(xì)胞在斑馬魚心臟再生過程中侵入受傷組織,。

論文信息：

論文題目：Border-zone cardiomyocytes and macrophages regulate extracellular matrix remodeling to promote cardiomyocyte protrusion during cardiac regeneration

期刊名稱：Nature Communications

時間期卷：16, Article number: 3823 (2025)

在線時間：2025年4月23日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-025-59169-4

產(chǎn)品信息：

貨號：CP-005-005

規(guī)格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology（靶點科技）

氯膦酸鹽脂質(zhì)體斑馬魚巨噬細(xì)胞。斑馬魚心臟冷凍損傷后,，多種細(xì)胞類型協(xié)調(diào)對損傷的反應(yīng),。例如，內(nèi)皮細(xì)胞,、心內(nèi)膜細(xì)胞和心外膜細(xì)胞已被證明可提供生長因子和信號分子,，以促進受傷組織的血運重建和心肌細(xì)胞再生。成纖維細(xì)胞主要起源于心外膜,，已被證明在心臟再生過程中沉積 ECM 以支持心臟,，并且對損傷后心肌細(xì)胞增殖至關(guān)重要。近年來,，免疫細(xì)胞在促進心臟再生過程中的重要性也得到了認(rèn)可,。特別是，巨噬細(xì)胞已被證明在斑馬魚,、蠑螈和新生小鼠心臟的損傷再生中起著重要作用,。巨噬細(xì)胞已被證明直接促進和調(diào)節(jié)冷凍損傷心臟中瘢痕/ECM 的組成。此外,，氯膦酸鹽脂質(zhì)體給藥（荷蘭Liposoma,，清除巨噬細(xì)胞）或使用遺傳模型消耗巨噬細(xì)胞會導(dǎo)致 CM 增殖和再生心臟新生血管形成缺陷。雖然很明顯,，許多（如果不是全部）心肌細(xì)胞類型在心臟再生過程中起著至關(guān)重要的作用,，但它們對冷凍損傷后心肌細(xì)胞纖維化組織重新填充的貢獻(xiàn)在很大程度上是未知的,。氯膦酸鹽二鈉脂質(zhì)體清除巨噬細(xì)胞在斑馬魚心臟凍傷模型巨噬細(xì)胞功能研究，荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：斑馬魚交界區(qū)心肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)重塑,，促進心臟再生過程中心肌細(xì)胞突出,。

氯膦酸鹽脂質(zhì)體巨噬細(xì)胞促進斑馬魚心肌凍傷修復(fù)模型中巨噬細(xì)胞清除解決方案：

注射方式：腹腔注射

注射劑量：10ul

注射時間點：根據(jù)實驗?zāi)康模Ｇ盎蛘呓：?/strong>

實驗數(shù)據(jù)：

巨噬細(xì)胞清除方案
Tg（mpeg：NTR-YFP） 成年魚的腦室受到冷凍損傷,。然后將冷凍損傷的魚在冷凍損傷后 4 至 6 天（每天補充）在 5 μm 尼呋匹林醇或 DMSO 對照水浴中孵育,。以 7 dpci 提取心臟，并用 GFP 抗體進行免疫染色,，以檢查巨噬細(xì)胞清除效率和鬼筆環(huán)肽染色,，以量化如上所述邊界區(qū)的 CM 突起。

為了清除駐留的巨噬細(xì)胞,，在冷凍損傷前 8 天用 10 μl 氯膦酸鹽脂質(zhì)體 （5 mg/ml） （Liposoma,， Amsterdam， The Netherlands） 或 PBS 對 Tg （mpeg1：EGFP） 成年魚進行 IP 注射,。如上所述,，以 7 或 10 dpci 提取心臟,，然后進行冷凍切片,、CHP 染色和鬼筆環(huán)肽染色。如上所述,，對邊界區(qū)的 CHP 強度和 CM 突起進行定量,。

為了在以后的時間點清除巨噬細(xì)胞，在 10 dpci 收集心臟之前,，以 3,、6 和 9 dpci ip（mpeg1：EGFP）注射 10 μl 氯膦酸鹽脂質(zhì)體 （5 mg/ml）（Liposoma，阿姆斯特丹,，荷蘭）或 PBS 對照脂質(zhì)體,。研究巨噬細(xì)胞清除對 CMs 中 mmp14b 過表達(dá)的影響，Tg（hsp70l：loxP-EGFP-loxP-mmp14b-P2A-tagBFP）;在冷凍損傷前 1 天和之后每 4 天向成年魚注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體或 PBS 脂質(zhì)體 Tg（?5.1myl7：CreERT2）,。如上所述,，進行他莫昔芬/乙醇注射和熱休克以誘導(dǎo) mmp14b 過表達(dá)。以 10 或 21 dpci 提取心臟,，然后按上述方式進行冷凍切片和鬼筆環(huán)肽或 MHC 染色,。如上所述，對邊界區(qū)的 CM 突出和 CM 皮質(zhì)覆蓋進行量化,。