當前位置:靶點科技(北京)有限公司>>技術文章>>肝臟巨噬細胞清除后回輸巨噬細胞方案和流程
研究肝臟功巨噬功能能時,我們經常用荷蘭liposoma的巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體(貨號CP-005-005)清除肝臟巨噬細胞KF,、然后回輸修飾或者感興趣的目的巨噬細胞,。既要確保原位的巨噬細胞被很好的清除,又要讓回輸的巨噬細胞在早起階段及時發(fā)揮作用且不能被巨噬細胞清除劑清除了,。這種既要,,又要,就要求注射清除劑后,,合適的時間點回輸目的細胞,。
肝臟巨噬細胞清除,建議尾靜脈注射,。注射后,,一般24h后,肝臟定居巨噬幾乎都被清除,。48h就可以回輸目的細胞,。鑒于回輸實驗比較難做,回輸細胞的數量,,活率,,純度以及功能性活性都決定了Transfer實驗的成功與否。
如下這張圖,,是機體巨噬細胞清除后,,目的巨噬細胞制備回輸再構的流程示意圖,。
以常見的IR模型為例。對于細胞回輸,,一般選擇尾靜脈注射細胞,,但是對于缺血再灌注模型(IR),可以考慮脾臟內注射,。
Macrophage adoptive transfer缺血再灌注模型,,回輸巨噬細胞
Mice were injected i.v. with 200 μl clodronate liposomes (Liposoma, Netherlands) 48 h before transfer for macrophage depletion. Then, the mouse partial liver IRI model was established in recipient mice. Freshly isolated intrahepatic macrophages from young or aged C57BL/6 mice were transplanted into aged or young recipient mice by intrasplenic injection (using a 30-G insulin syringe) at the time of reperfusion.
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