基于點(diǎn)擊化學(xué)的理論，科研人員開始設(shè)計(jì)出各種含有這些配對基團(tuán)的化學(xué)分子模塊用于生物分子的動態(tài)示蹤,，如：通過追蹤DNA合成狀況來評估細(xì)胞增殖能力,。最初，研究人員多采用放射性標(biāo)記核苷摻入法,，即在DNA合成過程中,，摻入氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷（[³H]thymidine），合成的DNA也因此具有放射性而被檢測出,。然而,，該方法靈敏度低、檢測耗時長并且具有放射性污染的憂患,，隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU（5’-bromo-2’-deoxyuridine）法所代替,。

BrdU法改善了前者靈敏度差、效率低等問題,，但該方法必須通過DNA變性（如酸變性等）來暴露BrdU表位以供BrdU抗體識別,。由于步驟繁多,，影響因素較多，該方法的重現(xiàn)性比較差,。此外,，與其它免疫組化染色一樣，BrdU法的染色效果受組織切片大小和抗體滲透性的影響,。

Comparison of BrdU and EdU labeling on the detection of DNA synthesis

于是,，Timothy J. Mitchison等人想到了將EdU（5-ethynyl-2‘-deoxyuridine），產(chǎn)品貨號：1149-100,，這種胸苷類似物混進(jìn)DNA的合成過程中,。與胸苷相比，EdU（5-Ethynyl-2′-deoxyuridine,，產(chǎn)品貨號：1149）只是將胸腺嘧啶堿基C5位上甲基替換成端炔基,。由于引入的基團(tuán)足夠小，不會影響EdU整合到DNA中,。此外,，隨后與EdU端炔基反應(yīng)的熒光疊氮化物探針也只有抗體分子的500分之一的大小，能夠高效穿透組織并直接與新合成的DNA結(jié)合,，操作簡單之余還會提高示蹤目標(biāo)的分辨率,、改善實(shí)驗(yàn)操作的可重復(fù)性。

Reproducibility of EdU labeling (A) and comparison with BrdU (B) in NIH 3T3 cells

自點(diǎn)擊化學(xué)的概念提出以來,，該反應(yīng)在20年間就被引用了上萬次,，可見其深遠(yuǎn)的影響力。諾貝爾獎委員會表示：“點(diǎn)擊化學(xué)是一種優(yōu)雅而有效的化學(xué)反應(yīng),，現(xiàn)已被廣泛用于藥物開發(fā),、繪制DNA以及創(chuàng)造更符合實(shí)際需求的材料。"

名稱：EdU（5-ethynyl-2‘-deoxyuridine）

貨號：1149

品牌：ClickChemistryTools

總代：靶點(diǎn)科技

CAS：61135-33-9

分子量：252.23

結(jié)構(gòu)：如下

隨著點(diǎn)擊化學(xué)ClickChemistry的被越來越多的人熟悉和知道,，相關(guān)應(yīng)用越來越多,。尤其是體內(nèi)應(yīng)用點(diǎn)擊化學(xué)的案例不斷涌現(xiàn)。用不了多久,，點(diǎn)擊化學(xué)將在體內(nèi)研究中百花齊放,。ClickChemistryTools提供一站式點(diǎn)擊化學(xué)研究工具盒，靶點(diǎn)科技攜手美國ClickChemistryTools為國人在點(diǎn)擊化學(xué)研究中添磚加瓦,。