顯微注射是在高倍倒置顯微鏡下,,利用顯微操作器,控制顯微注射針在顯微鏡視野內(nèi)移動的機械裝置,,用來進行細胞或早期胚胎操作的一種方法,。
動物顯微注射步驟:
1、注射針內(nèi)裝液:使用無菌的微量加樣器從微注射針的后部加入待注射樣品酚紅一滴,。
2,、注射針安裝和定位:
(1) 將裝液后的針頭的游離端安在連接器上,然后旋緊連接器以固定針頭,,再將其固定到微操作儀的托針管上,;
(2) 把載有待注射樣本的培養(yǎng)皿放在顯微鏡載物臺上,用低倍物鏡對準細胞調(diào)焦,;
(3)移動針頭并在顯微鏡下調(diào)整微操作儀,,直到針頭的陰影在視野的中心上方;
(4)使用工作用放大倍數(shù),,調(diào)準細胞焦距,,找到針尖。
3,、顯微注射:
(1)使針尖對準細胞的待注射部位(細胞與針尖在同一焦面上),旋轉(zhuǎn)推進旋鈕,,針刺入細胞內(nèi)(卵膜,、細胞膜、核膜),;
(2)旋轉(zhuǎn)加樣旋鈕,,將樣本加入,并離開細胞,。
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