PCR實(shí)驗室規(guī)劃如何設(shè)計
PCR實(shí)驗室布局
試劑準(zhǔn)備區(qū):擴(kuò)增試劑的制備,、包裝和貯存
樣品處理區(qū):樣品注冊,、子包,;核酸提取,、保存和加載
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測定,、結(jié)果分析,、注冊和報告
預(yù)擴(kuò)增區(qū)和后擴(kuò)增區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開,并且必須使用不同的房間,,最好在兩個區(qū)域之間有一定的間隔,。
使用商業(yè)試劑盒在樣品處理區(qū)域中制備小試劑
樣品處理區(qū)域和試劑制備區(qū)域可以位于同一房間,只要滿足以下操作和清潔要求:
在生物安全柜中操作,;
每個實(shí)驗者,、實(shí)驗組使用各自的試劑和消耗品;
將含有污染物的容器密封并使用一次,;
實(shí)驗前后對操作區(qū)域和共用設(shè)備進(jìn)行有效清潔和消毒,。
PCR實(shí)驗室建設(shè)規(guī)劃要點(diǎn)
1、主要結(jié)構(gòu):
主體是彩鋼板,、鋁合金型材,。房間的所有內(nèi)角、正角均由鋁合金50圓形鋁制成,,這解決了容易污染的問題,、灰塵、難以清潔等問題,。結(jié)構(gòu)牢固,,線條簡潔,,外形美觀,密封性好,。
2,、標(biāo)準(zhǔn)三區(qū)分離和氣壓調(diào)節(jié):
PCR過程分為試劑制劑。在三個獨(dú)立的實(shí)驗區(qū)中進(jìn)行,、樣品制備和PCR擴(kuò)增測定,。整個地區(qū)都有一個整體緩沖走廊。每個獨(dú)立的實(shí)驗區(qū)都設(shè)有一個緩沖區(qū),,每個區(qū)域都受氣壓調(diào)節(jié),,從而在整個PCR實(shí)驗過程中保護(hù)試劑和標(biāo)本免受氣溶膠污染,減少了對人和環(huán)境的擴(kuò)增產(chǎn)物的污染,。
緩沖器I可以打開,,緩沖器II的排氣扇和PCR放大區(qū)域在外面排出,可調(diào)節(jié)風(fēng)量的出風(fēng)口安裝在實(shí)驗區(qū)和每扇門的外壁上,,空氣通風(fēng)在室內(nèi)通過回風(fēng)口,。
3、消毒:
紫外燈安裝在三個實(shí)驗區(qū)域和三個緩沖區(qū)的頂部,,并在傳輸窗口內(nèi)進(jìn)行消毒,。
在試劑制備區(qū)域和樣品制備區(qū)域中還提供移動的紫外燈,以對實(shí)驗臺進(jìn)行部分消毒,。
4,、機(jī)械鏈不銹鋼傳遞窗:
試劑和樣品通過機(jī)械互鎖不銹鋼(不建議用于電子聯(lián)鎖)進(jìn)行交付,以確保試劑和樣品在轉(zhuǎn)移過程中不被污染(個人分流)
5,、地
建議使用PVC盤繞地板或自流動地板以獲得良好的地面,。易于清潔和耐腐蝕。水磨石地板也可以無條件地使用,,或者大塊瓷磚(至少800 mm x 800 mm)接縫需要小于2 mm,。
6、照明
燈具應(yīng)清潔光滑,,可達(dá)到易于清潔的特點(diǎn),、無塵。
注意施工過程
●標(biāo)準(zhǔn)化的安裝流程和全面的服務(wù)流程
●嚴(yán)格遵循科學(xué)設(shè)計的安裝流程,。
●安裝前,,需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,,電源線位置,,電話網(wǎng)線入口位置,進(jìn)水壓力,最小安裝空間,,地面,,通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管位置等,。理想的空間大小和通風(fēng)口的大小,。
>>>設(shè)計要點(diǎn)<<<
PCR實(shí)驗室可以是分散形式或組合形式。完成一組PCR實(shí)驗,,通常通過試劑制備,、樣品處理,、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析四個實(shí)驗步驟,,如果實(shí)驗過程需要,還應(yīng)增加樣品破碎過程,。
一個,、分散形成PCR實(shí)驗室
所謂的分布式PCR實(shí)驗室是指完成上述實(shí)驗過程的實(shí)驗室彼此相距很遠(yuǎn)并且處于分布式排列。對于這種類型的PCR實(shí)驗室,,不需要特殊條件,,因為實(shí)驗不容易相互干擾。
兩個,、組合形成PCR實(shí)驗室
所謂組合形式PCR實(shí)驗室是指完成PCR的四個實(shí)驗過程的實(shí)驗室彼此相鄰排列以形成獨(dú)立實(shí)驗區(qū)域的形式,。對于組合式PCR實(shí)驗室,由于每個實(shí)驗的集中安排,,容易引起相互干擾,,因此對整體布局和屏障系統(tǒng)有一定的要求。每個艙室在入口處設(shè)有緩沖室,,以減少室內(nèi)和室外空氣交換,。
PCR實(shí)驗室不可忽視的幾點(diǎn)設(shè)計
1.實(shí)驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計和壓力控制
PCR實(shí)驗室沒有嚴(yán)格的純化要求,但為了避免各個實(shí)驗區(qū)域之間存在交叉污染的可能性,,建議使用全流量全流量氣流組織,。同時,要嚴(yán)格控制排氣的比例為,、,,以保證每個實(shí)驗區(qū)的壓力要求。
2.預(yù)防和控制污染
PCR實(shí)驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染,。在實(shí)踐中,,以下類型的污染是常見的:擴(kuò)增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染,;試劑污染和試樣之間的污染,。由于污染發(fā)生,必須停止實(shí)驗直到找到污染源,并且必須丟棄實(shí)驗結(jié)果并且需要重復(fù)實(shí)驗,。因此,,在污染發(fā)生后,在實(shí)驗室周圍浪費(fèi)尋找污染源不僅浪費(fèi)時間和麻煩,,而且浪費(fèi)人力和資源,。因此,為避免污染,,應(yīng)首*行預(yù)防,,而不是排除。
PCR實(shí)驗室不可少的嚴(yán)格管理
(1)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗室的人員,。與實(shí)驗無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)入或離開實(shí)驗室,,必要時設(shè)置進(jìn)出整個實(shí)驗區(qū)的獨(dú)立通道和門;
(2)盡量減少實(shí)驗區(qū)域內(nèi)不必要的移動,,以減少交叉污染的可能性
(3)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是擴(kuò)增產(chǎn)物污染的最重要來源,。廢液不能傾倒在實(shí)驗室中。必須將其浸入消毒劑溶液中并丟棄在遠(yuǎn)離實(shí)驗室的地方,。使用過的堅端是一次性的,。材料也應(yīng)在消毒液中浸泡和消毒處理,如焚燒,;
(4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能存在一些基因突變和有毒物質(zhì),,應(yīng)特別注意實(shí)驗人員的安全防護(hù)。
3.完整的實(shí)驗室配套設(shè)施
完整的實(shí)驗室配套設(shè)施是確保實(shí)驗工作的必要條件,。設(shè)備和儀器應(yīng)根據(jù)每個實(shí)驗室的實(shí)驗內(nèi)容配備,,如超潔凈工作臺、離心機(jī),、取樣器等,。