熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜,、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度,、量子產(chǎn)率、熒光壽命,、熒光偏振等許多物理參數(shù),,從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。
熒光分光光度計(jì)的基本原理:
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來,。物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光,。不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;,,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定,。在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí),其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行,。
熒光分光光度計(jì)用途在于能夠?qū)Ξa(chǎn)生熒光的物質(zhì)進(jìn)行分析,廣泛應(yīng)用在生物,、化學(xué),、環(huán)境等領(lǐng)域,。
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