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當(dāng)前位置:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司>>技術(shù)文章>>實驗室常用知識,,使用Tris緩沖劑的注意事項!
生物緩沖劑在生物化學(xué)研究中有著重要的意義,,在免疫印跡,、生物芯片及生物雜交等實驗及體外診斷、生物醫(yī)藥等行業(yè)中的應(yīng)用非常多,。
生物緩沖劑系統(tǒng)包含幾十個品種,。典型品種如Tris、HEPES等,。本文將介紹Tris緩沖劑使用注意事項,。
注意事項:
1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031 ,,例如:4℃時緩沖液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,,所以一定要在使用溫度下進行配制,,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。
2.Tris緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,,需使用與Tris溶液具有兼容性的電極,;
3.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,,pH值的變化大于0.1
4. 吸入,,攝入,皮膚吸收Tris可造成傷害,,操作時需戴好手套和護目鏡,;
5. Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴密封;
6. Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),,包括RNA酶抑制劑,,醛,酶,,DNA以及常見金屬如Cr3+,,F(xiàn)e3+,Ni2+,,Co2+和Cu2+等,,在有些系統(tǒng)中會起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用,;
7. Tris緩沖液不適用于BCA測定,;
8. 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,,則不適宜用Tris,,較好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。
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