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組織搗碎機(jī)突然加速是什么原因

閱讀:384        發(fā)布時(shí)間:2021-11-1
 1機(jī)械法:主要通過機(jī)械切力的作用使組織細(xì)胞破碎的方法,,常用的器械有組織搗碎機(jī),、勻漿器,、研缽和研磨,、壓榨器等,。 
1.1組織搗碎機(jī) 將材料配成稀糊狀液,,放置于筒內(nèi)約1/3體積,,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,,開動(dòng)開關(guān)后,,逐步加速至所需速度。一般用于動(dòng)物組織,、植物肉質(zhì)種子,、柔嫩的葉芽等,轉(zhuǎn)速可高達(dá)10000rpm/M以上,。由于旋轉(zhuǎn)刀片的機(jī)械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用,。 
1.2勻漿器 先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,,上下移動(dòng),,即可將細(xì)胞研碎。勻漿器的研缽磨球和玻璃管內(nèi)壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離,。制作勻漿器的材料,,除玻璃外,還可以用硬質(zhì)塑料,、不銹鋼,、人造熒光樹脂等。此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,,適用于量少和動(dòng)物臟器組織,。 存在的問題;較易造成堵塞的團(tuán)狀或絲狀真菌,,較小的革蘭氏陽性首以及有些亞細(xì)胞器,,質(zhì)地堅(jiān)硬,易損傷勻漿閥,,也不適合用該法處理,。 
1.3. 研缽 多用于細(xì)菌或其他堅(jiān)硬植物材料,研磨時(shí)常加入少量石英砂,,玻璃粉或其他研磨劑,,以提高研磨效果。 1.44. 細(xì)菌磨 是一種改良了的研磨器,,比研缽具有更大的研磨面積,,而且低部有出口。操作時(shí)先把細(xì)菌和研磨粉調(diào)成糊狀,,每次加入一小勺,,研磨20-30秒即可將細(xì)菌細(xì)胞*磨碎。 
2 物理法 主要通過各種物理因素使組織細(xì)胞破碎的方法,。在生化制備中常用的方法有: 
2.1. 反復(fù)凍溶法 原理:因突然冷凍,,細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成及胞內(nèi)外溶劑濃度的突然改變而破壞細(xì)胞。 方法:將待破碎的細(xì)胞在-20度以下冰凍,,室溫融解,,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎,。 特點(diǎn):此法適用于組織細(xì)胞,多用于動(dòng)物性材料,,對微生物細(xì)胞作用較差,。 
2.2. 急熱驟冷法 將材料投入沸水中,維持85-90分鐘,,至水浴中急速冷卻,,此法可用于細(xì)菌及病毒材料。 
2.3. 超聲波處理 用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,,使細(xì)胞急劇震蕩破裂,,此法多適用于微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,,頻高于15~20KHz的超聲波在高強(qiáng)度聲能輸入下可以進(jìn)行細(xì)胞破碎。其破碎機(jī)理:可能與空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪切力有關(guān),。超聲破碎的效率與聲頻,、聲能,、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度及首種類型等因素有關(guān),。 行細(xì)胞破碎,。其破碎機(jī)理:可能與空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪切力有關(guān)。超聲破碎的效率與聲頻,、聲能,、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度及首種類型等因素有關(guān),。

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