在液相色譜上遇到的問題有很多,，例如HPLC 色譜柱的一些常見問題時(shí)有出現(xiàn),，可能會(huì)令很多實(shí)驗(yàn)員感到非常沮喪。那么今天,，恒譜生帶您了解這些是什么以及如何解決它們可以讓您避免數(shù)小時(shí)的挫敗感,。
一、無峰值：
可能有多種因素會(huì)導(dǎo)致 HPLC 輸出中不出現(xiàn)峰或出現(xiàn)非常小的峰,。正常讀數(shù)應(yīng)該又大又細(xì)的峰值,，高度也是會(huì)有不一樣的,。小峰或沒峰可能代表檢測器燈已關(guān)閉，沒有流動(dòng)相流量和樣品丟失或變質(zhì),，或者檢測器,、積分器、進(jìn)樣器閥或記錄器這些有問題存在,。
其實(shí)先要確保探測器是打開狀態(tài),，然后檢查所有連接情況。確保自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶中有足夠的液體和樣品中無氣泡情況出現(xiàn),，并使用新的標(biāo)液重新進(jìn)行系統(tǒng)的檢查,。
二、無流量：
如果沒有出峰,，很有可能是HPLC 色譜柱中沒有流量,；也可能意味著泵已關(guān)閉或流量因某種原因中斷或受阻；同時(shí)泵頭中也可能存在泄漏或空氣滯留,。
如果泵關(guān)閉,，需要啟動(dòng)泵并檢查儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相液位和整個(gè)系統(tǒng)的流量情況。檢查樣品環(huán)是否有其他障礙物或氣塞,，并確保流動(dòng)相組分可混溶且流動(dòng)相是否能夠進(jìn)行正常脫氣,。繼續(xù)檢查系統(tǒng)松動(dòng)情況，檢查泵是否有泄漏等其他問題,。
三,、壓力問題：
要是壓力低于平常或無壓力這有可能是系統(tǒng)某處發(fā)生泄漏或空氣滯留,；要是系統(tǒng)壓力過高,，那么泵、進(jìn)樣器,、在線過濾器,、保護(hù)柱、分析柱或管路都可能有問題,。
如果是檢查發(fā)現(xiàn)是低壓,，那就要檢查整個(gè)色譜系統(tǒng)是否存在泄漏、泵密封件故障或閥門損壞的情況等,。如果是高壓的話,，先從移除保護(hù)柱和分析柱，并用接頭替換,，將進(jìn)樣器重新連接到檢測器,。以 2-5 mL/min 的速度運(yùn)行泵，并開始查找原因,，,。如果問題是出現(xiàn)在分析柱上,，請?jiān)诜治鲋c檢測器斷開連接時(shí)反轉(zhuǎn)，并沖洗色譜分析柱,；在必要的時(shí)候更換入口濾芯或更換柱子,。
四、裂峰：
如果發(fā)現(xiàn)峰出現(xiàn)在中間下降形成M形,，那么可能是分析柱入口可能存在一些污染,；也可能在色譜柱入口處有篩板被堵塞了或存在了不均勻的空隙；還有可能是樣品溶劑與流動(dòng)相不相容,。
如果是入口處有污染,，請反轉(zhuǎn)并沖洗色譜柱，并在需要時(shí)更換篩板,。還可以用具有相同鍵合相功能的薄膜顆粒重新填充色譜柱頂部,，并繼續(xù)以反向流動(dòng)方向使用色譜柱；如果是問題出在樣品上,，請調(diào)整流動(dòng)相中的樣品,，因?yàn)闃悠泛土鲃?dòng)相中的 pH 值差異會(huì)導(dǎo)致分峰。
五,、尾峰和前峰：
發(fā)現(xiàn)峰不是直線上升和下降,，而是開始在前面或后面就形成輕微的傾斜，則稱為前端或尾部,。這通?？赡苁潜Ｗo(hù)柱或分析柱受損或是色譜柱過載。如果有拖尾峰,，請先移除保護(hù)柱并嘗試分析,，必要時(shí)就需要更換。如果需要恢復(fù)或更換分析柱,。一定要檢查流動(dòng)相的組成和色譜柱的性能,。有前峰的話，請嘗試注入更小的體積或稀釋樣品,；如果溶劑有問題請調(diào)整溶劑，并使用 50 柱體積的 HPLC 級乙酸乙酯以標(biāo)準(zhǔn)流速的兩倍或三倍沖洗極性鍵合相柱,，然后在開始分析之前使用中等極性溶劑,。
今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助,！
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
員.png)
7
立即詢價(jià)
您提交后,，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)