首先檢查色譜柱與儀器的連接和管道是否匹配,。使用色譜柱測試程序中建議的過濾和脫氣流動相沖洗您的 HPLC 泵和管路,。確保系統(tǒng)中沒有氣泡。將流速設(shè)置為0.1mL/min 并連接到色譜柱入口,，確保流速沿色譜柱上箭頭指示的方向,。擰緊進入色譜柱的末端接頭，將流速增加到 1mL/min（僅適用于4.6mm ID 色譜柱）持續(xù)5分鐘。在連接到流通池之前,，停止流動并擦拭色譜柱的出口端以去除其他任何的顆粒,。將色譜柱出口連接到流通池，以1 mL/min 的速度將大約10個色譜柱體積通過系統(tǒng)（僅適用于 4.6 mm ID 色譜柱）,，同時觀察背壓,。穩(wěn)定的背壓表明流量恒定，而出現(xiàn)波動可能表明系統(tǒng)中有空氣,，大幅波動可能會沖擊和損壞色譜柱,。當壓力穩(wěn)定在規(guī)定的范圍內(nèi)時，色譜柱就可以使用了,。
同時在更換溶劑時重新平衡系統(tǒng)時,，切勿將一種溶劑換成另一種不混溶的溶劑，無需通過與兩者混溶的中間溶劑,，否則會損壞色譜分析柱的性能,。如果緩沖液/鹽不溶于第二種溶劑，切勿換成（或換出）緩沖液/鹽溶液,。這也是會損壞色譜柱的性能的,。對于更復(fù)雜的樣品和延長液相色譜柱的使用壽命,，建議在色譜柱前安裝保護柱,。
對于需要多久檢查一次色譜柱的性能,，沒有一般的經(jīng)驗法則,，這取決于使用情況和應(yīng)用。建議在新色譜柱上運行測試樣品并將其作為參考,。隨著時間的推移,，將您自己的測試色譜圖與此原始色譜圖進行比較可以幫助您評估色譜柱是否失去了柱效，或者是否有其他影響性能的變化,?？梢酝ㄟ^定量分析效率、選擇性,、分離度和壓力等參數(shù)了解色譜柱的比較性能,。
1.選擇合適的液相保護柱,，免受非揮發(fā)性材料的損壞和污染,，保護柱填料的粒徑應(yīng)盡可能與色譜柱填料的粒徑相同。
2.留意色譜柱的pH范圍,。
3.避免猛烈撞擊或掉落色譜柱,，因為物理沖擊會在色譜柱中產(chǎn)生空隙和通道，從而導致峰拖尾和柱效損失。
4.確保色譜柱末端接頭,、管螺母和套圈兼容,。連接不兼容的接頭會導致泄漏、增加死體積和損壞色譜柱螺紋,。
5.如果色譜柱上刻有箭頭,，請安裝色譜柱，使流向與箭頭一致,。大多數(shù)色譜柱都有一個優(yōu)選的流動方向,，旨在避免色譜柱出現(xiàn)問題和故障。
今天恒譜生分享的知識先到這啦,，希望對您的工作有所幫助,！
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