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液相色譜基線異常的其中四種原因

閱讀:3479      發(fā)布時間:2022-9-9
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一,、導(dǎo)致高基線和變化基線的流動相雜質(zhì):

        雜質(zhì)在流動相中高度溶解的特定情況下,它們不會被色譜柱截留,,并有助于在整個色譜圖中產(chǎn)生高于正常的檢測器信號,。使用梯度洗脫時,如果雜質(zhì)僅存在于梯度中使用的一種溶劑中,,則檢測器信號可能會緩慢變化并且與在任何時間點對流動相有貢獻(xiàn)的溶劑比例有關(guān),。

        流動相雜質(zhì)不會表現(xiàn)為看起來像典型色譜峰的信號特征,因此它們不會直接與分析物峰本身發(fā)生沖突,。但是如果雜質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)與分離中的目標(biāo)分析物相似,,則雜質(zhì)可以表現(xiàn)為基線中看起來像典型峰的特征。有時這些被稱為“鬼峰",,因為即使沒有樣品注入,,它們也會持續(xù)存在于基線中。

色譜柱-DSC_7707 (2)

二,、檢測器對主要流動相組分的響應(yīng):

        有時候用于 LC 方法的溶劑制備中的微小變化會對基線的外觀產(chǎn)生巨大影響,。這種效應(yīng)的一個典型例子是從磷酸鹽緩沖流動相變?yōu)槭褂眉姿嶙鳛樘砑觿┑牧鲃酉唷1M管磷酸鹽物質(zhì)對低至約 200 nm 的紫外光具有高度透明性,但羧酸鹽物質(zhì)(如甲酸鹽,、乙酸鹽)比約 230 nm 以下的磷酸鹽吸收更多,。當(dāng)使用梯度洗脫時,很容易觀察到這種差異,,并且添加劑僅存在于流動相梯度中使用的一種溶劑中(例如,,大部分水性溶劑)。

三,、由于泵問題導(dǎo)致流動相組成不一致:

         粘性止回閥和滯留氣泡是高壓泵頭流量不一致的常見原因,當(dāng)二元泵系統(tǒng)中的兩個泵中的一個發(fā)生故障時,,可能會導(dǎo)致通過 HPLC 色譜柱并最終到達(dá)檢測器的流動相成分發(fā)生變化,。如果使用中的檢測器對這些成分變化很敏感,那么異常檢測器基線可能是真正由泵引起的問題的征兆,。舉個例子,, A 溶劑含有乙酸銨,B 溶劑是乙腈,,并且在 210 nm 處使用 UV 檢測的情況,。在這種情況下,A 溶劑比 B 溶劑吸收更多的光,,但如果 A/B 混合物的成分隨時間保持一致,,則將觀察到平滑、平坦的檢測器基線,。但是,,如果來自 A 通道的流量由于止回閥問題或氣泡而變得不一致,則 A/B 混合物的成分將不一致,,從而導(dǎo)致基線中出現(xiàn)鋸齒狀圖案,。

四、溫度影響:

        不同的檢測器以不同的方式受到溫度變化的影響,。折射率 (RI) 檢測的信號基線對溫度變化非常敏感,。因此,穩(wěn)定檢測器本身和實驗室環(huán)境的溫度將有助于最大限度地減少基線漂移,。UV 吸光度檢測器也容易發(fā)生溫度變化,,這會導(dǎo)致基線漂移,但與 RI 檢測器相比,,變化程度較小,。與過去的舊設(shè)計相比,現(xiàn)代紫外線檢測器設(shè)計對實驗室溫度變化的影響要小得多,。

色譜柱柱管-DSC_6069

        面對色譜系統(tǒng)中的流動相存在雜質(zhì)的情況,,恒譜生可以為您解決這些問題,恒譜生流動相過濾頭具有以下這些特性:

(1)性能穩(wěn)定,抗沖擊和交變負(fù)載能力優(yōu)于其他金屬過濾材料;

(2)孔隙均勻穩(wěn)定,,透氣性好,,壓力損耗小、過濾精度高,、分離效果過濾性能穩(wěn)定;

(3)機(jī)械強(qiáng)度優(yōu)異,,無須外加骨架支撐保護(hù),安裝和使用簡單,,維護(hù)方便,,組裝性好。

(4)易于反吹,、可清洗,、再生能力強(qiáng),反復(fù)清洗再生后過濾性能恢復(fù)90%以上,,使用壽命長,、材料利用率高。

溶劑吸濾頭-DSC_3654

       恒譜生鬼峰捕集去除柱可以有效吸附流動相中的雜志,,從而縮短了方法驗證和雜質(zhì)分析的時間,。鬼峰捕集去除柱主要的特點是能夠去除溶劑包括有機(jī)溶劑中的雜質(zhì),在反相色譜梯度分析時,,將小柱安裝在梯度混合器和自動進(jìn)樣器之間,,不僅能夠去除流動相中的雜質(zhì),還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì),。

鬼峰去除柱-DSC_3835

        今天恒譜生分享的知識先到這啦,,希望對您的工作有所幫助!


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