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簡述hplc色譜柱與hplc的區(qū)別,?

閱讀:2947      發(fā)布時間:2022-2-14
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  由于高效液相色譜具有速度快,、分離效果好、靈敏度高等優(yōu)點,,因此應(yīng)用越來越廣泛,。HPLC色譜柱是HPLC系統(tǒng)的重要組成部分。使用時需謹(jǐn)慎使用,,使用后必須進(jìn)行保養(yǎng),,以免下次使用出現(xiàn)問題。色譜柱的頻繁更換是非常昂貴的,因此為了節(jié)約成本,,需要更大程度的延長色譜柱的使用壽命,。同時,必須小心維護(hù)色譜柱,,以保持每次獲得結(jié)果時的準(zhǔn)確性和一致性,。深圳恒譜生總結(jié)了7個關(guān)于色譜柱的誤區(qū),希望能延長使用壽命,。
  誤區(qū)一:HPLC色譜柱不能反吹
  一般情況下,,液相色譜柱的設(shè)計耐壓值遠(yuǎn)高于ZUI大工作壓力。更換柱子時,,反吹可以清除柱頭一些吸附性強(qiáng)的物質(zhì),,我們把這些殘留的物質(zhì)沖掉,防止壓力升高,。但是如果你買的色譜柱在柱頭使用大粒徑填料,,反吹時這部分填料會被沖掉。因此,,在選擇是否反吹之前,,您必須檢查您使用的液相色譜柱。
  誤區(qū)二:所有C18列都一樣
  在早期的HPLC系統(tǒng)中,,C18是標(biāo)準(zhǔn)反相色譜的鍵合固定相,,因此C18被用作反相色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。然而,,時代不會停滯不前,。人們對科學(xué)的追求和認(rèn)識越來越深刻,出現(xiàn)了更多的固定相,,許多C18色譜柱也誕生了,。雖然也使用硅膠作為基質(zhì),但各有其特定的填料鍵合合成工藝,,因此色譜性能不同,。所以僅僅因為名稱都是C18列,認(rèn)為性能是一樣的是錯誤的,。
  誤區(qū)三:空氣一旦進(jìn)入HPLC色譜柱就會損壞
  我們都知道,,當(dāng)色譜柱沒有連接到色譜儀時,要保證色譜柱密封嚴(yán)密,。但在實際應(yīng)用中,,即使有少量空氣進(jìn)入色譜柱末端,也不是什么大問題,。色譜柱與色譜儀連接使用時,,在系統(tǒng)初始加壓過程中,空氣會在短時間內(nèi)被溶劑擠出。因此,,不要僅僅因為少量空氣進(jìn)入色譜柱就認(rèn)為色譜柱已損壞,。
  誤區(qū)四:不需要保護(hù)柱
  事實上,使用保護(hù)柱有很多優(yōu)點,。高效液相色譜的流動相中常使用各種試劑,,其中混有一些不溶或不純的物質(zhì)。大多數(shù)不溶物可以通過用篩子或膜過濾器過濾流動相來去除,,但不能*過濾非常細(xì)的顆粒,。另外,流動相調(diào)制后,,不溶,、不純的物質(zhì)有可能通過空氣、容器,、人體等落下,,這些不溶、不純的物質(zhì)會污染色譜柱,、堵塞色譜柱,,或?qū)ιV柱產(chǎn)生不佳影響。對分析的影響,。
  此時,通過在色譜柱前安裝分析保護(hù)柱,,可以防止其產(chǎn)生,,保護(hù)色譜柱。與更換昂貴的分析柱相比,,添加或更換保護(hù)柱只需很少的費用,。液相色譜保護(hù)柱幾乎沒有死體積,更換方便,。適用于UHPLC系統(tǒng)的高壓,,截留那些強(qiáng)保留且不可吸附的化合物。樣品和流動相的過濾可以保持保護(hù)柱對化學(xué)污染物的吸附能力,,更長時間地保持柱效,,延長色譜柱的使用壽命。
  誤區(qū)五:反相色譜柱不能使用純水相
  當(dāng)使用低有機(jī)溶劑含量或純水作為反相色譜柱的流動相時,,一些色譜工作者會遇到相塌陷,。因此,有人認(rèn)為反相色譜柱不能使用純水,。但實際上,,市面上銷售的反相色譜柱(如極性包埋柱和極性封蓋柱)都是親水性的,其表面特性允許使用純水,不會造成塌陷或保留時間偏移,。
  誤區(qū)六:粒徑越小,,柱填料壓力越高,分離效果越好
  色譜柱的性能不能僅僅通過填料是否超小粒徑和超高柱壓來評價?,F(xiàn)代對色譜柱柱特性的研究越來越深入,,已經(jīng)開發(fā)出一些提高色譜柱效率的方法。例如,,新型表面多孔材料色譜柱的柱效與亞2?mUHPLC色譜柱一樣好,。與傳統(tǒng)色譜柱相比,它的柱壓非常低,。
  誤區(qū)七:柱壓不會影響色譜分離效果
  近年來,,HPLC色譜柱柱壓問題引起了眾多色譜工作者的關(guān)注。色譜圖的很多參數(shù)受柱壓影響,,包括一些溶質(zhì)的摩爾體積,、滯留體積、柱孔隙率,、保留因子和流動相等,。如果在13.789MP的壓力下操作色譜柱,即使保留時間差異很小,。但是,,當(dāng)柱壓接近2000psi(13.789MPa)時,柱壓的影響可能比較明顯,。

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