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貨物所在地:北京北京市
產(chǎn)地:英國
更新時間:2024-09-28 21:00:06
有效期:2024年9月28日 -- 2025年3月28日
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英國Kirkstall Quasi Vivo細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng)
Quasi Vivo® 系統(tǒng)有 3 個不同的腔室可用,每個腔室都旨在滿足特定應(yīng)用的需求,。 | |||
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允許浸沒式細(xì)胞培養(yǎng),,而模塊化特性允許互連細(xì)胞共培養(yǎng)。 | 與市售的 transwells 和插入物兼容,,使用戶能夠在氣液界面培養(yǎng)細(xì)胞并創(chuàng)建液/液屏障模型,。 | 由標(biāo)準(zhǔn)多孔板占地面積上的 6 個腔室組成,由幾乎沒有或沒有非特異性結(jié)合的材料制成,。 | |
顛fu傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)方式,,灌流培養(yǎng)系統(tǒng)
呼吸道上皮細(xì)胞的氣液界面培養(yǎng)是研究經(jīng)空氣傳播的病原體,如SARS等的常用的模型,。傳統(tǒng)的培養(yǎng)方式是用TransWell在普通培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。但是此種培養(yǎng)方式無法模擬培養(yǎng)過程中營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物在組織內(nèi)的運(yùn)輸,培養(yǎng)得到的模型通常有各種各樣的缺陷,并且所需實驗周期較長,。
呼吸道上皮細(xì)胞的常規(guī)transwell靜止培養(yǎng)方式 | Quais Vivo(QV600)灌流培養(yǎng)系統(tǒng)(腔室+儲液瓶+底座+管道+泵等) |
而灌流培養(yǎng)系統(tǒng)可為細(xì)胞培養(yǎng)提供持久恒定的流動培養(yǎng)環(huán)境,大限度模擬體內(nèi)環(huán)境,。研究發(fā)現(xiàn),,使用系統(tǒng)進(jìn)行灌流培養(yǎng)與靜態(tài)培養(yǎng)相比,氣液界面培養(yǎng)的呼吸道上皮細(xì)胞(正常人氣管上皮細(xì)胞 Normal Human BronchialEpithelial Cells,,簡稱NHBE,;小氣道上皮細(xì)胞 Small Airway EpithelialCells,簡稱SAE),,發(fā)育分化速度更快,,表現(xiàn)為纖毛分化度更高,纖毛運(yùn)動更強(qiáng),、粘液產(chǎn)生和屏障功能更強(qiáng),。在灌注下加速分化后,將上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)移到靜態(tài)條件下,,并添加抗原呈遞細(xì)胞(APC)以研究其在病原體感染后的功能,。(ChandorkarP, et al., Fast-track development of an in vitro3D lung/immune cell model to studyAspergillus infections. Sci Rep. 2017 7(1):11644. doi:10.1038/s4-4.)
01、人體內(nèi)所有的細(xì)胞都需要營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物的流動 | 02,、肺部氣管/支氣管和小氣道上皮結(jié)構(gòu)精細(xì),,進(jìn)行體外 培養(yǎng)模擬體內(nèi)環(huán)境,對呼吸道病原體的研究至關(guān)重要 | 03,、采用全新的灌流培養(yǎng)方式培養(yǎng)呼吸道上皮細(xì)胞 (采用QV600) |
相比使用transwell靜止培養(yǎng)(StaticConditions),此灌流培養(yǎng)系統(tǒng)(PerfusedConditions)中,,呼吸道上皮細(xì)胞的生長和分化呈現(xiàn)更好狀態(tài)
04、電鏡照片顯示,,采用灌流培養(yǎng)方式(Perfusedconditions)的呼吸道上皮細(xì)胞,, 分化程度更高 | 05、使用MUC5B染色可以發(fā)現(xiàn),,采用灌流培養(yǎng)方式(Perfusedconditions)的呼吸道上皮細(xì)胞,,在培養(yǎng)的第7天即可分泌大量粘液。染色可以發(fā)現(xiàn),,細(xì)胞間的緊密連接發(fā)育更完善 |
06,、使用WGA染色發(fā)現(xiàn),采用灌流培養(yǎng)方式(Perfusedconditions)的呼吸道上 皮細(xì)胞,,纖毛分化度更高 | 07,、測量TEER(經(jīng)細(xì)胞電阻),采用灌流培養(yǎng)方式(Perfusedconditions)的呼吸道上皮細(xì)胞TEER值更大,,代表得到的上皮細(xì)胞膜狀結(jié)構(gòu)更完整 |
Quasi Vivo全球應(yīng)用
全球使用Kirkstall公司灌流培養(yǎng)系統(tǒng)的學(xué)術(shù)及研究機(jī)構(gòu)已達(dá)70+個,,遍布美國、英國,、法國,、瑞典,、奧地利、意大利,、荷蘭,、瑞士、日本等,。目前灌流培養(yǎng)系統(tǒng)已成功用于以下器官模型的培養(yǎng):
1.呼吸系統(tǒng)(培養(yǎng)熱點)
2. 肝臟
3. 腎臟
4.心血管
5.成纖維細(xì)胞
6.糖尿病模型
7.血腦屏障
8.腦組織類器官
一,、不同細(xì)胞,型號怎么選,?
01,、單一細(xì)胞 QV500:所有腔室培養(yǎng)相同的細(xì)胞。 | 02,、細(xì)胞共培養(yǎng) QV600:每個腔室培養(yǎng)2種或以上細(xì)胞,。 | QV900:使管路上游的細(xì)胞培養(yǎng)基成為下游細(xì)胞的條件培養(yǎng)基。 |
流動培養(yǎng)形成含血管的3D心臟組織 | 再生醫(yī)學(xué)
在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,,怎樣培養(yǎng)出含血管的組織,,是未來應(yīng)用能否成功的關(guān)鍵之一。早期的臨床試驗采用生長因子或細(xì)胞注射的方法來修補(bǔ)損傷的心臟,,但由于注射細(xì)胞造成的炎癥反應(yīng)和局部缺血會在體內(nèi)造成低氧環(huán)境,,使得注射的細(xì)胞定植率低而死亡率高,不能有效地修復(fù)損傷的心臟功能,。
Quasi VivoQV500流動培養(yǎng)系統(tǒng)為接種在明膠支架上的人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)和人心肌祖細(xì)胞(hCMPC)提供充足的氧氣,,促進(jìn)細(xì)胞和營養(yǎng)物質(zhì)向支架核心內(nèi)擴(kuò)散,并能快速有效地排除組織內(nèi)的代謝廢物,,促進(jìn)血管生成,,從而形成由血管樣和心臟樣細(xì)胞組成的組織結(jié)構(gòu)密集的適于體內(nèi)移植的原組織。(PagliariS, et al. A multistep procedure to prepare pre-vascularized cardiactissue constructs using adult stem cells, dynamic cell cultures,and porous scaffolds. Frontiers in Physiology. 2014; 5:210)
流動培養(yǎng)系統(tǒng)(QV500型)的蠕動泵將培養(yǎng)基從儲液瓶泵到兩個串聯(lián)的培養(yǎng)腔室內(nèi),, 并能保持恒定流速(200μl/min),,保證多孔明膠支架內(nèi)層的培養(yǎng)基流動。 | 構(gòu)建含血管的3D心臟的實驗方案示意圖,。明膠多孔支架被浸入稀釋的Matrigel中,,然后轉(zhuǎn)移至內(nèi)皮分化培養(yǎng)基中。之后將人間充質(zhì)干細(xì)胞接種在支架上,,使人間充質(zhì)干細(xì)胞定植在支架培養(yǎng)上并向內(nèi)皮進(jìn)行分化,,96小時后,將在聚苯乙烯細(xì)胞培養(yǎng)板用心臟分化培養(yǎng)基預(yù)先定型2周的心臟GFP人心肌祖細(xì)胞接種于血管化的支架上,,用QV500流動培養(yǎng)系統(tǒng)在心臟分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,。 |
采用上述實驗方案,對用QV500培養(yǎng)一周后的共培養(yǎng)結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測, 發(fā)現(xiàn)在支架上有大量細(xì)胞定殖,。 | QV500流動培養(yǎng)條件下支架內(nèi)部浸潤了大量的血管樣細(xì)胞(紅色)和人心肌前體細(xì)胞 (hCMPC)衍生的心肌細(xì)胞(綠色),,而靜態(tài)培養(yǎng)條件下,細(xì)胞大部分分布在支架表面,。 |
免疫組化結(jié)果顯示通過QV500動態(tài)培養(yǎng)可以促進(jìn)心肌樣細(xì)胞(GFP,,綠色)和 內(nèi)皮樣細(xì)胞(VCAM-1陽性細(xì)胞,紅色)向支架內(nèi)部浸潤,。 | (A)切片顯示QV500流動培養(yǎng)的內(nèi)皮樣細(xì)胞(VCAM-1陽性細(xì)胞,紅色)排列成孔狀,,形成管狀結(jié)構(gòu),,并與心肌樣細(xì)胞(GFP,綠色)接觸,。 (B)QV500流動培養(yǎng)條件下,,支架內(nèi)廣泛的細(xì)胞分布導(dǎo)致形成密集組裝的多細(xì)胞組織,該組織衍生自所用的人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)和人心肌前體細(xì)胞(hCMPC),。 |
總結(jié):在本文中使用的QV500流動培養(yǎng)系統(tǒng),,能增強(qiáng)氧氣與營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸,進(jìn)而增強(qiáng)工程化心血管組織的活性和功能,。 與眾不同的流動培養(yǎng)系統(tǒng),,讓日、美,、英,、法、瑞士,、瑞典等全球70多個研究機(jī)構(gòu)獲得了更強(qiáng)大的細(xì)胞培養(yǎng)工具,,在包括呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng),、肝臟,、腎臟、腸道,、腦組織類器官,,以及糖尿病的研究上更進(jìn)一步。 | |
流動培養(yǎng)實現(xiàn)血腦屏障三種細(xì)胞共培養(yǎng) | 阿爾茨海默病新模型 | 血腦屏障(blood-brain barrier,BBB)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的生理和病理中都起著重要的作用,。血腦屏障功能異常會引起包括阿爾茨海默癥(AD)等許多神經(jīng)退行性疾病,。組成血腦屏障的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞(capillaryendothelialcells)、周細(xì)胞(pericytes)以及星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocytes)間的復(fù)雜的相互作用使得很難在體內(nèi)確定這三種細(xì)胞對神經(jīng)毒性各自的貢獻(xiàn),。 |
![]() | 而流動培養(yǎng)系統(tǒng)可為體外培養(yǎng)這三種細(xì)胞提供在不形成屏障的情況下維持細(xì)胞間通訊的佳培養(yǎng)環(huán)境,。流動培養(yǎng)系統(tǒng)為未來研究不同類型的血腦屏障細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和細(xì)胞毒性試驗中的特殊作用提供一個有價值的工具。(Miranda-AzpiazuP, et al. A novel dynamic multicellular co-culture system forstudying individual blood-brain barrier cell types in braindiseases and cytotoxicity testing. Sci Rep. 2018; 8(1):1-10.) |
圖 1.單獨培養(yǎng)的人星形膠質(zhì)細(xì)胞(A,GFAP陽性),、周細(xì)胞(B,,α-actin陽性)、 血管內(nèi)皮細(xì)胞(C,,CD31陽性)以及血管內(nèi)皮細(xì)胞形成的緊密連接(D,,ZO1陽性)。 | 圖 2用QV500培養(yǎng)共享相同的培養(yǎng)基的星形膠質(zhì)細(xì)胞,、周細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的示意圖(A),,R為儲液瓶,P為蠕動泵,。連接培養(yǎng)基存儲瓶的一個QV500流動培養(yǎng)系統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)腔室(B),。 |
圖 3 QV500流動培養(yǎng)系統(tǒng)建立的能同時培養(yǎng)三種不同細(xì)胞的多細(xì)胞共培養(yǎng)體系。 | 圖4幾種流動培養(yǎng)方式示意圖:A圖為單獨星形角質(zhì)細(xì)胞流動培養(yǎng),,B圖為單獨周細(xì)胞流動培養(yǎng),,C圖為單獨血管內(nèi)皮細(xì)胞流動培養(yǎng),D圖為三種細(xì)胞組合后一起流動培養(yǎng),。 |
圖5用MTT法測細(xì)胞活力,,與靜態(tài)培養(yǎng)相比,采用QV500流動培養(yǎng)系統(tǒng)對單獨培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞(HBECs),、周細(xì)胞(HBVPs),、星形角質(zhì)細(xì)胞(HAs)(A)或三種細(xì)胞共培養(yǎng)(B)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞活力有明顯升高。 | 圖6用MTT法測細(xì)胞活力,,與靜態(tài)培養(yǎng)(Static)相比,,流動培養(yǎng)(Dynamic)的周細(xì)胞(HBVPs)會更早受到Aβ25-35(淀粉樣蛋白β肽的Aβ25-35片段,用于阿爾茨海默病的造模)的毒害,。 |
總結(jié):本文中研究者利用QV500流動培養(yǎng)系統(tǒng)建立了三種細(xì)胞的共培養(yǎng),。這些細(xì)胞不接觸,通過共享培養(yǎng)基實現(xiàn)細(xì)胞間的通信,,不形成屏障能更好的研究這些細(xì)胞類型單獨對不同化合物的響應(yīng)情況,。并且研究者還發(fā)現(xiàn)共享相同培養(yǎng)基的星形膠質(zhì)細(xì)胞、周細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的適流速為50µl/min,。 作為創(chuàng)新的細(xì)胞培養(yǎng)方法,,Quasi Vivo流動培養(yǎng)已經(jīng)全球70余家zhuanye機(jī)構(gòu)使用驗證,獲得了令人側(cè)目的培養(yǎng)效果,,在美,、英、法,、日等多國開展了頗具新意的細(xì)胞研究,,涉及呼吸系統(tǒng),、肝臟、腎臟,、心血管,、成纖維細(xì)胞、糖尿病模型,、腦組織類器官等,。 |
英國Kirkstall Quasi Vivo細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng)
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