型號:DEP

品牌:3dep

3D細(xì)胞介電電泳分析系統(tǒng)

微電極結(jié)構(gòu)開發(fā)的進(jìn)展已導(dǎo)致使用非均勻交流電場對細(xì)胞，微生物和其他生物顆粒進(jìn)行介電電泳表征和分選的新技術(shù),。 這些方法利用了細(xì)胞的介電極化率的差異來實(shí)現(xiàn)其有效性,，控制這些性質(zhì)的因素包括膜和任何細(xì)胞壁的電導(dǎo)率和介電常數(shù)，與表面電荷相關(guān)的雙電層,，細(xì)胞形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu),。 介電泳的應(yīng)用包括細(xì)菌，活細(xì)胞和不活細(xì)胞,，癌細(xì)胞和正常細(xì)胞以及紅細(xì)胞和白細(xì)胞的混合物的選擇性空間操縱和分離,。

1. 系統(tǒng)介紹

該系統(tǒng)是個(gè)的,、功能更強(qiáng)大的,、更簡單的技術(shù)細(xì)胞介電電泳分析系統(tǒng)，廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞的分化,、癌細(xì)胞及細(xì)菌抗性的檢測,、癌細(xì)胞凋亡的快速檢測、病毒顆粒的特性檢測,、水質(zhì)的檢測,、酵母細(xì)胞的存活狀態(tài)快速檢測，穿膜藥物對血細(xì)胞的影響等,。

2. 基本原理

細(xì)胞在高頻不均勻電場作用下產(chǎn)生極化,，不同的細(xì)胞由于介電特性、電導(dǎo)率,、形狀不同而感應(yīng)出不同的偶電極,，因此受到不同介電力的作用.

（如圖1.所示）。

圖1.電場變化對微粒產(chǎn)生不同的作用力

PositiveDEP-正介電泳力,，Negative DEP-負(fù)介電泳力

3.  系統(tǒng)亮點(diǎn)概述

通過測量細(xì)胞運(yùn)動(dòng)速度,，可得到細(xì)胞的介電特性；可對細(xì)胞進(jìn)行無物理接觸的選擇性操縱,、定位,、分離。

3.1對細(xì)胞進(jìn)行無物理接觸操縱,、定位,、分離。

    對細(xì)胞無損傷,，保證細(xì)胞后續(xù)實(shí)驗(yàn)安全

 3.2無需試劑或其他添加劑

    既節(jié)約日后的使用成本,，又能保證細(xì)胞不收試劑的干擾，保證實(shí)驗(yàn)細(xì)胞的原生態(tài)。

3.3功能強(qiáng)大,、操作簡單,，快速

3DEPtech是目前的介電電泳分析系統(tǒng)，功能強(qiáng)大,，應(yīng)用涉及新藥研發(fā),、樣品準(zhǔn)備、診斷,、體外細(xì)胞毒性檢測等方面,，操作簡單，只需簡單的三個(gè)步驟,。傳統(tǒng)的介電電泳使用的是微組裝設(shè)備,，只能一次分析一個(gè)樣品，耗時(shí)2-3 h,，而3DEPtech 使用的是配套的DEP-well多孔板,，一次能同時(shí)分析20個(gè)樣品，只需要10 s,。另外相比于傳統(tǒng)的細(xì)胞介電電泳分析系統(tǒng),，3DEPtech增加了電極的面積，增加了檢測的準(zhǔn)確性,。

圖3.DEP-Well使用

3.4*無需化學(xué)標(biāo)記,，測后樣品無損傷，保證繼續(xù)后續(xù)操作

  傳統(tǒng)的分子標(biāo)記方法是檢測細(xì)胞的化學(xué)變化,，而DEP對細(xì)胞的生理變化比較敏感,，如細(xì)胞胞質(zhì)的離子成分和組成，膜電位,，膜電導(dǎo)，細(xì)胞形態(tài),、大小,、形狀等，這些變化做標(biāo)記比熒光標(biāo)簽更有優(yōu)勢,，能更快更早更準(zhǔn)確的檢測出細(xì)胞的變化,，費(fèi)用更低；DEP檢測細(xì)胞的生理變化,，操作對細(xì)胞樣品*無損傷,，操作后可以收回繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)，減少了重復(fù)制備樣品的繁雜步驟,。

3.5 DEP-well采用的光譜技術(shù),。

   3DEP是一種新的光密度檢測系統(tǒng)，DEP-well技術(shù)核心是DEP光譜技術(shù),，光譜信號可以提供很多細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)的信息,，可以檢測細(xì)胞在電場中的變化,，是細(xì)菌或細(xì)胞極化的指標(biāo)，根據(jù)細(xì)胞或細(xì)菌的性狀不同,，光譜范圍可以調(diào)整,，增大了實(shí)用性，可以檢測不同的生物顆粒,，簡化了操作步驟及減少了費(fèi)用,，可以直接檢測樣品的生理變化，減少了假陽性或假陰性的產(chǎn)生,。

圖4.DEP光譜

A typical DEP spectrum. Analysis allowsdetermination of the membrane resistance (blue) and capacitance (red), andcytoplasm conductivity (lime).

3.6一次性DEP-well 多孔設(shè)計(jì),，無交叉污染風(fēng)險(xiǎn)

設(shè)備使用的DEP-well是與設(shè)備配套的多孔板，使用新方法設(shè)計(jì),，價(jià)格便宜,，一次性使用，不用擔(dān)心交叉污染的問題,，可以一次測取不同的樣品,，每個(gè)樣品設(shè)置多個(gè)平行對照；應(yīng)用范圍比較廣泛涉及到生物,、醫(yī)學(xué),、農(nóng)畜業(yè)、制藥等領(lǐng)域,，應(yīng)用細(xì)胞凋亡,、干細(xì)胞分化、腫瘤細(xì)胞的檢測,。

3.7高通量連續(xù)快速分離不同細(xì)胞,，進(jìn)行細(xì)胞分選。

不同的細(xì)胞性狀不同,，在電場中被極化產(chǎn)生的介電力的方向和大小也不同,，根據(jù)介電電泳原理，利用3DEPtech就可以快速分離不同的細(xì)胞,，達(dá)到對細(xì)胞進(jìn)行分選的目的,；此設(shè)備分離細(xì)胞的效率達(dá)到mL/min，可以根據(jù)使用者的需求調(diào)整,。

圖5.微粒的分離

4. 應(yīng)用領(lǐng)域

5. 主要參數(shù)

主要檢測指標(biāo)：細(xì)胞形態(tài),，細(xì)胞膜變化,、細(xì)胞質(zhì)導(dǎo)電率，細(xì)胞膜表面電導(dǎo)率及電容

芯片：1.0mm一次性芯片（20片裝）,，每片20孔,，每孔可容納1000個(gè)細(xì)胞
芯片體積：<150μL

頻率范圍：0.5kHz到45Mhz
幅度：0 – 20 V peak to peak

電    壓：交流電壓

檢測時(shí)間：10s

檢測方式：一次多孔檢測，采用光譜技術(shù),，DEP Reader讀取

使人們可以更好地理解細(xì)胞的電生理學(xué)：

膜電導(dǎo)描述了膜通過其或在其周圍傳導(dǎo)電荷的能力,。 它可能會(huì)受到膜表面電荷，離子通道活性和膜形態(tài)的影響,； 可以確定后一個(gè)原因,，即有效膜電容存在類似變化，通常認(rèn)為該變化幾乎*受膜形態(tài)的影響,。 乘以細(xì)胞表面積,，得出細(xì)胞電生理學(xué)中常用的全細(xì)胞電導(dǎo)率參數(shù)。

有效的膜電容

有效的膜電容描述了膜存儲(chǔ)電荷的能力,。盡管通常膜的組成變化很?。ㄒ虼耍恍K膜可以存儲(chǔ)的電荷量保持近似恒定）,，但是該模型假定表面是臺(tái)球光滑且球形的。與此背離的情況（例如,，當(dāng)細(xì)胞表面被氣泡,，微絨毛或內(nèi)陷物覆蓋時(shí)）意味著實(shí)際上存在的膜比預(yù)期的多，這意味著存儲(chǔ)了更多的電荷,。這在模型中顯示為每單位單元面積有效膜電容的升高值,。自然地，這使該參數(shù)成為細(xì)胞表面形態(tài)的很好指標(biāo)；如果一個(gè)單元實(shí)際上是的球形,，我們可以預(yù)期每單位面積的電容為8mFm-2,，比例增加表示面積的比例增加也差不多。近的工作表明,，某些改變膜成分的細(xì)胞機(jī)制（例如糖基化）可以在不改變形態(tài)的情況下發(fā)揮作用,，但是常見的解釋是形態(tài)學(xué)。這是區(qū)分細(xì)胞的非常有效的方法-包括觀察分化中的干細(xì)胞的變化或癌細(xì)胞與健康細(xì)胞之間的差異,。在解釋膜電導(dǎo)的變化時(shí),，也可用于識(shí)別形態(tài)變化。與電導(dǎo)率一樣,，乘以面積即可得出細(xì)胞電生理中常用的全細(xì)胞電容

細(xì)胞內(nèi)電導(dǎo)率度量

細(xì)胞內(nèi)電導(dǎo)率是細(xì)胞質(zhì)中離子電荷的量度,，可以自由移動(dòng)并因此有助于傳導(dǎo)。它與膜電位有關(guān),。細(xì)胞質(zhì)的電導(dǎo)率與細(xì)胞中正電荷和負(fù)電荷的總和有關(guān),，而膜電位則來自于正電荷和負(fù)電荷數(shù)目的差異。因此,，它是改變離子濃度或離子通道活性的有用標(biāo)記,。它也是細(xì)胞通透性的非常有用的標(biāo)記。當(dāng)細(xì)胞膜變得可滲透時(shí),，出現(xiàn)的孔允許細(xì)胞內(nèi)部和外部之間連接,，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)電導(dǎo)率迅速下降。它也是凋亡的有用標(biāo)志物,，因?yàn)榈蛲黾壜?lián)反應(yīng)中的個(gè)事件是離子外排和水外排,，這兩種情況均可顯著改變電導(dǎo)率（前者下降，后者上升）,。實(shí)際變化取決于細(xì)胞類型和凋亡誘導(dǎo)劑,，但變化通常很明顯。如果將1除以細(xì)胞內(nèi)電導(dǎo)率,，則可得出細(xì)胞電生理中常用的細(xì)胞質(zhì)電阻率參數(shù),。

鑒別細(xì)胞癌性或非癌性

有時(shí)，樣品將包含兩種或多種具有*不同的電特性的細(xì)胞類型的混合物,。如果存在兩個(gè)或三個(gè)這樣的總體,，則可以對其中兩個(gè)進(jìn)行建模。例如,，在凋亡研究中,，常見的是凋亡小體的形成，凋亡小體通常以半徑為0.5-1μm的第二種群出現(xiàn),，且細(xì)胞內(nèi)電導(dǎo)率低于正常水平,。盡管這不是直接的比較方法（因?yàn)檫@兩個(gè)種群的大小和吸光度不同）,，但這兩個(gè)種群的比率卻指示了它們的相對濃度。我們已經(jīng)成功地在同一樣本中對三個(gè)總體進(jìn)行了建模,，盡管這需要非常高質(zhì)量的光譜,，這可以通過使用提供的軟件對許多不同光譜求平均來獲得。在種群非常異質(zhì)的地方,，例如從口腔拭子采集的臨床樣本中,，無法確定所有種群的特性；但是,，可以使用3DEP軟件根據(jù)不同的色散特性來區(qū)分不同的樣本,。在不需要確定實(shí)際電生理參數(shù)的情況下，已使用此技術(shù)將臨床樣品分類為癌性或非癌性,。