ELISPOT酶聯免疫斑點技術使用

淋巴細胞受到抗原刺激后局部產生細胞因子，此細胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(預包被的)的特異性單抗捕獲,。去除細胞后，被捕獲的細胞因子與Biotin標記的單抗結合,，其后再與堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶標記的親和素結合,。加底物顯色后，PVDF膜上出現紫色或紅褐色的斑點表明細胞產生了細胞因子,，通過酶聯免疫斑點分析儀（ELISPOT Reader）對斑點的進行自動計數和分析,。

德國biosys由化學家兼工程師Werner Freber創(chuàng)建于1986年,，專注于 EliSpot酶聯免疫斑點計數和定量自動化檢測分析設備30多年，biosys公司的立體3D雙光照明（增強斑點與背景的對比度,，有效抑制板孔側壁反光造成的“幻影現象",，提高檢測度），能進行單斑點,、每孔光密度測定以定量細胞因子分泌的照明系統,，解決了ELISPOT斑點計數的快速化，標準化和斑點信息的詳細化,，并且可以對細胞因子進行定量分析,，是能進行單斑點、每孔光密度測定以定量細胞因子分泌的照明系統,，獲得應用于ELISPOT斑點識別的3D雙光源技術,，實現對ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識別，個采用改進機械結構的前置式載物臺和自動開關密閉檢測室,，同一孔中同時識別多至12色ELISPOT斑點,，實現熒光ELISPOT檢測，歐盟科技項目,產品成熟,，30年歷史,，1000多家實驗室使用，國內近百家單位使用,，已成為熒光/Elispot酶聯免疫斑點檢測分析的金標準,。

世聯博研北京科技有限公司是德國BIO-SYS包含bioreader酶聯免疫斑點分析儀和biocount病毒菌落計數儀在內全系列產品在中國大陸、香港,、澳門,、中國臺灣區(qū)域總授權代理商，為廣大科研用戶提供BIO-SYS全系列產品提供售前,、售中和售后服務

Biosys酶聯免疫斑點圖像計數和分析產品特點：

●立體3D雙光照明系統：

增強斑點與背景的對比度,，有效抑制板孔側壁反光造成的“幻影現象",，提高檢測度,。能進行單斑點、每孔光密度測定以定量細胞因子分泌的照明系統,。
● 彩色成像及分析系統：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩數碼成像系統,，可進行雙色或三色Elispot實驗結果的檢測。也適用于病毒斑(Viral Plaque),、克隆形成(CFU),、腫瘤細胞集落形成（HTCFA）,干細胞集落形成試驗等。  數據量高達5M 的圖像數據（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能, 一體化HP 20’ 液晶顯示器.
● 高精度X－Y定位載板臺：

采用高精度齒輪步進電機,，避免了皮帶輪步進電機的打滑和老化,，定位精度<0.01mm,。

高精度微步進電機、齒輪傳動方式,、樣品架移動精度< 0.01mm
● 通用性強：

適用各種載玻片,、35-100mm培養(yǎng)碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培養(yǎng)板,。對于實驗室常用的U-Cytech,、MILLIPORE、NUNC,、 Whatman,、Greiner等公司的透明培養(yǎng)板、不透明（白色）培養(yǎng)板,、以及PVDF膜培養(yǎng)板均適用,。
● 自動聚焦：

需進行不同類型培養(yǎng)板的檢測時，無須手動調焦,，轉換更為方便,。
●高靈敏性，高特異性的優(yōu)點：

動態(tài)“像素周圍識別",，模糊,、彌散、過大,、過小斑點以及高背景或不規(guī)則背景均可檢測,。
●高分辨率：

每孔可檢測多至2000個斑點，直徑>3m 的斑點即可被有效檢測（通常設定檢測的斑點大小為20-50m）,。
●邊沿識別系統：

尤其針對透明板,、白色PVDF板，可有效識別板孔邊緣,，保證整個板孔的計數,。
●光密度值測定：

應用ELISA透光測量原理，可對每個斑點,，每個孔進行光密度值測定,，定量分析細胞因子分泌。
●*的WASHOUT背景補償功能：

對于背景重的培養(yǎng)板孔可進行自動背景補償調節(jié),。
●測量結果可信：

已經過MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT產品的驗證,，測量結果可信度高。
●用戶自定義參數和再分析：

用戶可根據試驗情況設置斑點識別參數,，直接重新分析已掃描數據,，不必重復掃描。相同參數下分析結果可重復性為+/-*,。
●“One－Click"測量區(qū)域選擇：

直觀的板孔選擇界面,，可輕松進行單孔,、任意孔區(qū)域、全板掃描,。
●智控分析方式：

用戶可手動選擇需去除的斑點,，自定義需去除的破損區(qū)域或無法識別區(qū)域，測量結果更可信,。
●數據分析全面：

包括培養(yǎng)孔原始數據如每孔斑點數,、斑點幾何形狀（直徑、圓度,、曲率,、毛糙度）參數、每個斑點坐標,、光密度（提示細胞因子量）等以及樣本均數,、方差、統計學分布等多種統計數據和分析圖表,。
●直接輸出模式：

可將整板圖像,，單孔圖像，每孔斑點數,，斑點詳細數據,、分布、和統計學分析結果直接輸出到Word,、Excel,、Powerpoint?？蛇x擇HTML,BMP, JPEG, PDF等多種格式,。
●檢測快速：超高精度掃描每個培養(yǎng)板約需12-15分鐘；快速掃描每個培養(yǎng)板約需6-8分鐘 ,。
● 歐盟CE認證,、符合21 CFR PART 11認證要求

●歷史悠久，產品成熟度高,、文獻量大：

30多年歷史驗證,，1500多個實驗室成功使用，國內有50多的單位成功使用,，無技術和應用風險,。

應用范圍：

單細胞解析度/體外抗原特異性T細胞頻率的準確測量,，細胞因子協同表達/雙色ELISPOT，腫瘤免疫,，T細胞功能研究,，移植免疫等；對探索免疫系統疾病的發(fā)病機制和腫瘤免疫細胞治療評價具有重要意義,。

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