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肝缺血(HI)大鼠模型
動物品系：SD大鼠,，SPF級,，健康,，雄性，體重：200g~220g
實驗分六組：空白對照組,、模型組,、陽性藥物組、受試藥物低,、中,、高劑量組
實驗周期：72h
造模方法：缺血再灌注
1.大鼠行術(shù)前12 h禁食，自由飲水,。
2.腹腔注射麻醉,，麻醉成功后將大鼠平躺在手術(shù)臺上膠帶固定四肢，將大鼠腹部至劍突術(shù)區(qū)剃毛 ,，術(shù)區(qū)消毒,。
3.取腹正中切口1cm，打開腹腔,，小心分離出肝臟左,、中葉之肝蒂（左、中葉肝臟供血的門靜脈和肝動脈）,。
4. 用無創(chuàng)血管夾夾閉中葉和左葉的門靜脈和肝動脈,，使約70%的肝臟缺血，以防止發(fā)生嚴重腸系膜靜脈淤血,。0.5min后,，與非阻斷的右葉相比，肉眼可見阻斷葉明顯變白,，說明阻斷成功,，用止血鉗夾閉皮膚切口臨時關(guān)閉腹腔，同時將大鼠放在37℃恒溫加熱墊上保溫,。
5. 完成持續(xù)缺血60min后,，重新打開腹腔，迅速取出血管夾,，恢復缺血肝血流,，0.5min左右可見缺血區(qū)肝臟由白色逐漸恢復為鮮紅色表明再灌注成功，逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關(guān)閉腹腔,，完成手術(shù),。待大鼠清醒后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng)，密切關(guān)注大鼠的狀態(tài)及生存狀況并做好記錄,。
6. 術(shù)后分別于再灌注0h,、3h、6h,、12h,、24h及72h處死大鼠,，下腔靜脈取血1ml，室溫靜置2h后于4℃3000r離心10分鐘提取血清,，放入-80冰箱凍存,。采用全自動生化分析儀檢測血清中ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）的水平,。同時統(tǒng)一取肝左葉組織1．5cm×1cm×0．2cm留作病理標本或分生標本,。
注意事項
1.分離肝門時用棉簽分離，可避免對肝臟的損傷
2.術(shù)前禁食有利于手術(shù)進行
3.阻斷血流要一次成功,，否則會造成缺血預(yù)處理,，減輕損傷程度
4.再灌后用棉簽輕輕按壓肝臟，有利于血流恢復
5.取材時鑷子不要損傷肝臟
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