詳細(xì)介紹
美國Advanced Biomatrix Lifeink200 中和的I型膠原蛋白生物墨水
Lifeink ® 200
中和的I型膠原蛋白生物墨水,,35毫克/毫升
目錄#5278
Lifeink ® 200是35毫克/毫升的I型膠原生物油墨用于基于擠出3D生物打印,。Lifeink ® 200是作為一個中性pH值,,等滲生物油墨,并準(zhǔn)備加入細(xì)胞和生物打印,。
產(chǎn)品描述
對于具有Lifeink打印® 200,,我們強(qiáng)烈建議使用FRESH印刷技術(shù)和在2-8℃下進(jìn)行打印。三維(3D)凝膠可用于研究細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的機(jī)械特性(例如密度和剛度)對細(xì)胞發(fā)育,,遷移和形態(tài)的影響,。與2D系統(tǒng)不同,3D環(huán)境允許細(xì)胞擴(kuò)展與所有細(xì)胞表面上的整合素同時相互作用,,從而激活特定的信號通路,。凝膠剛度或剛度在3D和2D環(huán)境中對細(xì)胞遷移的影響也不同。
類似于生命的生物墨水應(yīng)包括以下特征:高印刷分辨率,,剪切稀化,,強(qiáng)大的機(jī)械強(qiáng)度,優(yōu)異的細(xì)胞相容性,,允許細(xì)胞重塑并且具有仿生性,。Lifeink ® 200種滿足這些要求。
生物基質(zhì)提供Lifeink ® 200,,生物油墨這是一個35毫克/毫升的I型膠原,。Lifeink ® 200是pH值中性膠原用生理鹽濃度。使用受控的制造過程純化膠原蛋白起始材料,。
閱讀使用Lifeink開創(chuàng)性的出版物® 200生物打印心臟部件在這里,。
Lifeink ® 200生物油墨具有下列特性如下所示:
參數(shù),測試和方法 | Lifeink ® 200#5278 |
滅菌方法 | 過濾,,無菌處理 |
無菌-USP修改 | 沒有增長 |
形成 | 不透明凝膠/糊劑 |
包裝尺寸 | 5毫升 |
貯存溫度 | 2-8°攝氏度 |
打印溫度 | 2-8°攝氏度 |
保質(zhì)期 | 自收到之日起至少6個月 |
內(nèi)毒素-LAL | < 10.0 EU / mL |
pH值 | 6.9-7.6 |
重量克分子滲透壓濃度(mOsmo H2O / kg) | 290-370 |
原始資料 | 牛膠原蛋白 |
電泳圖樣-考馬斯藍(lán) | 特性 |
膠原蛋白濃度-Biuret | 30-45 mg / mL |
膠原蛋白純度-銀染色 | > 99% |
連續(xù)流擠出 | 通過 |
使用說明
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注意:在膠原蛋白和其他溶液的制備和處理過程中,,應(yīng)采用無菌操作以保持產(chǎn)品的無菌性。
注意:建議在膠原蛋白制備過程中將膠原蛋白和其他工作溶液冷卻,。
注意:不建議在任何步驟渦旋膠原蛋白,。
注意:確保沒有氣泡進(jìn)入系統(tǒng)?;旌蠒r系統(tǒng)中的氣泡會將您的墨水變成泡沫狀材料,。
注:我們建議打印Lifeink ® 在2-8℃,,成明膠漿料支持(FRESH方法),,以獲得*效果。
細(xì)胞向Bioink的添加:
注意:在整個過程中保持膠原蛋白的低溫
- 將細(xì)胞培養(yǎng)基中的濃縮細(xì)胞懸液添加到無菌注射器中,。
第1步的視頻
注意:我們建議終的生物墨水細(xì)胞濃度為5X10 6 / mL或更高,。
注意:為獲得*結(jié)果,,每5 mL膠原蛋白Bioink添加2 mL細(xì)胞懸液。對于較小的體積,,請使用類似的比率,。
- 將無菌耦合器放在帶有細(xì)胞懸液的注射器末端。
- 緩慢推入柱塞,,直到介質(zhì)在注射器上耦合器末端上方形成輕微的外部彎液面,。
- 用膠原蛋白從注射器上取下蓋子,并慢慢推入柱塞,,直到膠原蛋白在注射器末端上方形成輕微的外部彎液面,。
- 注射器與細(xì)胞耦合到膠原蛋白的注射器。 (確保系統(tǒng)中沒有氣泡,。兩個注射器上的“外部彎月面”有助于確保沒有氣泡進(jìn)入),。
- 緩慢前后推動活塞約40次,以確保充分混合,。后用注射器中用于打印的所有材料結(jié)束,。
第2-6步的視頻
- 現(xiàn)在,充滿細(xì)胞的生物墨水已準(zhǔn)備好用于正排量打印機(jī),。在打印之前,,請等待5-10分鐘,使注射器平衡回2-8°C,,以達(dá)到*效果,。
注意:對于氣動打印機(jī),使用耦合器將膠原蛋白轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)淖⑸淦髦?。新注射器?yīng)已插入密封件,,但已卸下柱塞。轉(zhuǎn)移膠原蛋白以清除所有氣泡后,,以2000 RPM的速度將注射器離心1分鐘,。如果已經(jīng)混入了細(xì)胞,請勿進(jìn)行離心步驟,。
觀看此視頻以獲取幫助
一般印刷注意事項:
- 要使用較小量的膠原蛋白,,只需使用提供的無菌耦合器將所需量的膠原蛋白轉(zhuǎn)移到另一個注射器中即可。要除去新注射器中的空氣,,可以執(zhí)行以下任一操作:
- 離心注射器(加蓋),,使蓋子朝上,以使空氣在蓋子上積聚,。疏散空氣,。
- 離心注射器(加蓋),使蓋子朝下,然后使用止血器擠壓注射器,,同時推動柱塞以使空氣逸出,。
用止血視頻去除空氣
- 在向注射器/生物墨水添加細(xì)胞后的1小時內(nèi)完成打印,以獲得*的細(xì)胞生存力結(jié)果,。
- 當(dāng)用FRESH明膠漿液打印時,,讓終的打印結(jié)構(gòu)在37°C下孵育30至60分鐘,然后用介質(zhì)代替明膠,。
- 避免氣泡,。
產(chǎn)物細(xì)胞測定
第2天的成纖維細(xì)胞
脂肪干細(xì)胞第1天
脂肪干細(xì)胞第六天
第yi天成纖維細(xì)胞
第5天的成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡介
全尺寸人類新生兒心臟
產(chǎn)品參考
對于Lifeink參考® 膠原bioinks:
Lee,A,。 等,。 膠原蛋白的3D生物打印,可重建人的心臟,。 科學(xué) 365,, 482-487(2019)。
Maxson,,Eva L.等,。“ 3D-Bioprinted組織工程化心臟瓣膜支架的體內(nèi)重塑。” 生物 印刷(2019):e00059,。
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美國Advanced Biomatrix Lifeink200 中和的I型膠原蛋白生物墨水