rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨
rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域
- 細(xì)胞骨架組織:
-無毒肌動(dòng)蛋白可視化
-熒光染色 - 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué):
-細(xì)胞過程中的肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)
- 活細(xì)胞成像和顯微鏡檢查
技術(shù)特點(diǎn)
- *的生物相容性-活體樣品的無毒染色
- 容易產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系
- 用于體外和體內(nèi)應(yīng)用
技術(shù)指標(biāo)
濃度 | 1 x 10 7 TU /毫升 |
存儲(chǔ) | -80°攝氏度 |
TagGFP2(Ex max / Em max) | 483/506納米 |
TagRFP(Ex max / Em max) | 555/584納米 |
注意:
請(qǐng)注意,,您將使用包含傳染性病毒的產(chǎn)品,。對(duì)于所有含有BSL-2生物的材料,,遵循推薦的NIH指南,。

了解更多
請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。
在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南,,以PDF格式,。
LifeAct是一種17個(gè)氨基酸的肽,來源于釀酒酵母的一種蛋白質(zhì),。LifeAct對(duì)活的或固定的真核細(xì)胞和組織中的絲狀肌動(dòng)蛋白(F-actin)結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色,。
請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。
源自人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的慢病毒載體已成為將基因傳遞至哺乳動(dòng)物細(xì)胞的主要工具,。慢病毒載體的利特征是能夠在體外和體內(nèi)介導(dǎo)有效的轉(zhuǎn)導(dǎo),,整合和長期表達(dá)進(jìn)入分裂和非分裂細(xì)胞的能力。
具有水泡性口炎病毒包膜G(VSV-G)蛋白的假型包膜擴(kuò)大了靶細(xì)胞范圍,。慢病毒載體現(xiàn)已顯示可將基因傳遞至神經(jīng)元,,淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。先前的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體無法用于這些細(xì)胞類型,。此外,,慢病毒載體已被證明可有效地體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)腦,肝,,肌肉和視網(wǎng)膜,,而無任何毒性作用或免疫反應(yīng)。
所提供的慢病毒是VSV-G假型泛嗜性病毒,,它既可以感染分裂細(xì)胞也可以感染非分裂細(xì)胞,,同時(shí)能夠穩(wěn)定整合到細(xì)胞基因組中。

用rLV-LifeAct轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞后,,使用熒光標(biāo)記TagGFP2或TagRFP **可視化F-肌動(dòng)蛋白,。使用這種方法,即使在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型(例如原代細(xì)胞(例如神經(jīng)元細(xì)胞))中,,也可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)100%的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。該病毒可用于產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系,并可通過熒光分選選擇穩(wěn)定的克隆,。
當(dāng)需要瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)LifeAct時(shí),LifeAct質(zhì)??捎糜谠S多細(xì)胞類型,。在這種情況下,研究人員可以在兩種不同的啟動(dòng)子之間進(jìn)行選擇:CMV(巨細(xì)胞病毒)或CAG(修飾的雞β-肌動(dòng)蛋白),。
腺病毒載體可用于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,,或需要高達(dá)100%轉(zhuǎn)基因表達(dá)的細(xì)胞,。在這種情況下,也可以在前面提到的兩個(gè)啟動(dòng)子之間進(jìn)行選擇,。這些載體適用于僅需要LifeAct-TagGFP2或LifeAct-TagRFP瞬時(shí)表達(dá)的應(yīng)用,。
方法比較:使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin
| LifeAct-Plasmid | LifeAct-mRNA 和Fuse-It-mRNA | LifeAct蛋白 與Fuse-It-P | LifeAct- 腺病毒 | LifeAct- 慢病毒 |
方法適用于1 |
細(xì)胞系 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
原代細(xì)胞 | + | +++ | ++ | +++ | +++ |
非哺乳動(dòng)物細(xì)胞 | -- | + | + | -- | -- |
|
轉(zhuǎn)染穩(wěn)定性 |
短暫的 | 是 | 是 | 是 | 是 | 沒有 |
穩(wěn)定 | 是 | 沒有 | 沒有 | 沒有 | 是 |
|
協(xié)議與分析 |
協(xié)議簡單 | +++ | ++ | ++ | +++ | +++ |
LifeAct讀出開始 | 1-2天 | 幾個(gè)小時(shí) | 幾分鐘 | 1-2天 | 1-2天 |
LIFEACT讀出持續(xù)時(shí)間 | 幾天 (如果穩(wěn)定,則無限遠(yuǎn)) | 幾天 | 多1天 | 幾天 | 幾天 (如果穩(wěn)定,,則無限遠(yuǎn)) |
信號(hào)強(qiáng)度 | +++ | +++ | + | +++ | +++ |
|
額外好處 |
防止過度表達(dá)的 假象 | -- | + | +++ | + | + |
預(yù)防病毒反應(yīng) | +++ | +++ | +++ | -- | -- |
轉(zhuǎn)移 方法的生物相容性 | + | +++ | +++ | ++ | ++ |
肌動(dòng)蛋白功能 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
|
安全考慮 | | | | | |
生物安全等級(jí) | BSL1 | -- | -- | BSL2 | BSL2 |
1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類型中進(jìn)行了測試,。我們鼓勵(lì)您使用此表作為指導(dǎo),以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng),。
注:楊清辰發(fā)布