pCMV / pCAG-LifeAct質(zhì)粒 現(xiàn)貨
肌動(dòng)蛋白標(biāo)記物,，用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后可視化活細(xì)胞中的F-肌動(dòng)蛋白
活細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白的出色可視化-細(xì)胞骨架組織和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的成像
對(duì) 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)的潛在干擾小
出色的信噪比
用穩(wěn)定的細(xì)胞系進(jìn)行長(zhǎng)期肌動(dòng)蛋白染色
凍干質(zhì)粒
CMV（巨細(xì)胞病毒）或CAG（修飾的雞β-肌動(dòng)蛋白）啟動(dòng)子

pCMV / pCAG-LifeAct質(zhì)粒 現(xiàn)貨

pCMV / pCAG-LifeAct質(zhì)粒 現(xiàn)貨

應(yīng)用領(lǐng)域

• 細(xì)胞骨架組織：
  -無(wú)毒肌動(dòng)蛋白可視化 -熒光染色 
• 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)：
  -細(xì)胞過(guò)程中的肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)
  - 活細(xì)胞成像 和顯微鏡檢查

技術(shù)特點(diǎn)

• 用于瞬時(shí)和穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染
• *的生物相容性-活體樣品的無(wú)毒染色

技術(shù)指標(biāo)

存儲(chǔ)	–20°C
TagGFP2（Ex max / Em max）	483/506納米
TagRFP（Ex max / Em max）	555/584納米
表達(dá)載體	哺乳動(dòng)物
發(fā)起人	CMV或CAG
交貨	凍干
真核生物抗性	新霉素（Geneticin，G418）

觀看我們的電影：

p CMV LifeAct-TagGFP2 轉(zhuǎn)染的原代樹(shù)突小鼠細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白動(dòng)態(tài)的活細(xì)胞成像,。

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請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息,。

在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南，以PDF格式。

矢量地圖

pCAG-LifeAct-TagGFP2

pCAG-LifeAct-TagRFP

pCMV-LifeAct-TagGFP2

pCMV-LifeAct-TagRFP

實(shí)驗(yàn)示例：攝取疏螺旋體期間人類(lèi)巨噬細(xì)胞細(xì)胞骨架的重組,。

疏螺旋體細(xì)菌是萊姆病的病因,，也稱(chēng)為萊姆疏螺旋體病。為了防止疏螺旋體的散播,，已證明必需被巨噬細(xì)胞攝取和消除,。該過(guò)程涉及巨噬細(xì)胞骨架，特別是肌動(dòng)蛋白微絲的動(dòng)態(tài)重組,。

在該實(shí)驗(yàn)中,，使用LifeAct質(zhì)粒來(lái)可視化疏螺旋體吞噬過(guò)程中人巨噬細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重組。

原發(fā)性人類(lèi)巨噬細(xì)胞對(duì)疏螺旋體的吞噬作用,。共聚焦z堆棧的延時(shí)電影,，顯示表達(dá)RFP-LifeAct（紅色）的主要人類(lèi)巨噬細(xì)胞，內(nèi)化了幾個(gè)表達(dá)GFP的螺旋體（綠色）以及富含肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞突起,。序列41分鐘 Mirko Himmel博士和Stefan Linder教授,，德國(guó)漢堡埃彭多夫大學(xué)的數(shù)據(jù)，

LifeAct：在活細(xì)胞中可視化F-Actin的多功能工具

LifeAct是一種17個(gè)氨基酸的肽,，來(lái)源于釀酒酵母的一種蛋白質(zhì),。LifeAct對(duì)活的或固定的真核細(xì)胞和組織中的絲狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息,。

當(dāng)需要瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)LifeAct時(shí),，LifeAct-Plasmids可用于多種細(xì)胞類(lèi)型。在這種情況下,，研究人員可以在兩種不同的啟動(dòng)子之間選擇,，CMV（巨細(xì)胞病毒）或CAG（修飾的雞β-肌動(dòng)蛋白）。對(duì)于許多標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系,，CMV啟動(dòng)子是選擇,，因?yàn)樗蓪?dǎo)致LifeAct的強(qiáng)表達(dá)。但是,，在處理敏感細(xì)胞（例如神經(jīng)元或胚胎干細(xì)胞）時(shí),，通常建議使用CAG啟動(dòng)子，因?yàn)樗鼪](méi)有病毒來(lái)源,，并且不太可能干擾細(xì)胞防御機(jī)制（“沉默機(jī)制”） ,。

用pLifeAct轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，使用熒光標(biāo)記TagGFP2或TagRFP **觀察F-肌動(dòng)蛋白,。細(xì)胞系的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可對(duì)各種應(yīng)用進(jìn)行長(zhǎng)期的肌動(dòng)蛋白染色,。

腺病毒載體可用于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞或需要高達(dá)100％轉(zhuǎn)基因表達(dá)的細(xì)胞。在這種情況下,，也可以在上述兩個(gè)啟動(dòng)子之間進(jìn)行選擇,。

此外,，還提供了不同的穩(wěn)定細(xì)胞系，有助于延長(zhǎng)日常實(shí)驗(yàn)室生活,。您可以立即開(kāi)始執(zhí)行實(shí)驗(yàn),，而無(wú)需費(fèi)時(shí)費(fèi)力地生成穩(wěn)定的細(xì)胞系，同時(shí)仍可確保高質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn),。

方法比較：使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin

	LifeAct-Plasmid	LifeAct-mRNA  和Fuse-It-mRNA	LifeAct蛋白  與Fuse-It-P	LifeAct-  腺病毒	LifeAct-  慢病毒
方法適用于1
細(xì)胞系	+++	+++	+++	+++	+++
原代細(xì)胞	+	+++	++	+++	+++
非哺乳動(dòng)物細(xì)胞	--	+	+	--	--
轉(zhuǎn)染穩(wěn)定性
短暫的	是	是	是	是	沒(méi)有
穩(wěn)定	是	沒(méi)有	沒(méi)有	沒(méi)有	是
協(xié)議與分析
協(xié)議簡(jiǎn)單	+++	++	++	+++	+++
LifeAct讀出開(kāi)始	1-2天	幾個(gè)小時(shí)	幾分鐘	1-2天	1-2天
LIFEACT讀出持續(xù)時(shí)間	幾天 （如果穩(wěn)定,，則無(wú)限遠(yuǎn)）	幾天	多1天	幾天	幾天 （如果穩(wěn)定，則無(wú)限遠(yuǎn)）
信號(hào)強(qiáng)度	+++	+++	+	+++	+++
額外好處
防止過(guò)度表達(dá)的 假象	--	+	+++	+	+
預(yù)防病毒反應(yīng)	+++	+++	+++	--	--
轉(zhuǎn)移 方法的生物相容性	+	+++	+++	++	++
肌動(dòng)蛋白功能	+++	+++	+++	+++	+++
安全考慮
生物安全等級(jí)	BSL1	--	--	BSL2	BSL2

1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類(lèi)型中進(jìn)行了測(cè)試,。我們鼓勵(lì)您使用此表作為指導(dǎo),，以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng)。

 注：楊清辰發(fā)布