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細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)

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一、實(shí)驗(yàn)介紹：

　　細(xì)胞凋亡（apoptosis）一般是指機(jī)體細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程中或在某些因素作用下,，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而發(fā)生的一種程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death),。細(xì)胞凋亡對(duì)胚胎發(fā)育及形態(tài)發(fā)生（morphogenesis）、組織內(nèi)正常細(xì)胞群的穩(wěn)定,、機(jī)體的防御和免疫反應(yīng),、疾病或中毒時(shí)引起的細(xì)胞損傷、老化,、腫瘤的發(fā)生進(jìn)展起著重要作用,，并具有潛在的治療意義。

　　在正常細(xì)胞中,，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),，而在細(xì)胞凋亡早期,，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白,，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,，故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一,。將Annexin V進(jìn)行熒光素（EGFP,、FITC、APC）標(biāo)記,，以標(biāo)記了的Annexin V作為熒光探針,，利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。

　　PI和7-AAD是一種核酸染料,，它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,，但對(duì)凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI（或7-AAD)能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅,。因此將Annexin V與PI（或7-AAD)匹配使用，就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開來(lái),。

 

二,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>

檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。

 

三,、實(shí)驗(yàn)步驟：

 

四,、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

 

五、送樣運(yùn)輸要求：

　　武漢市內(nèi)送樣,，細(xì)胞量不低于1*106,，流式檢測(cè)樣品需提供熒光信息，如果細(xì)胞帶熒光,，一定要在交接單和培養(yǎng)板上備注,，否則按照無(wú)熒光處理，如果因此導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不可用及樣本浪費(fèi),，我方概不負(fù)責(zé),，也不接受退單。