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應(yīng)用簡介
       自噬與多種生理反應(yīng)相關(guān)，比如腫瘤,，炎癥,，免疫應(yīng)答，氧化應(yīng)激等,。通常情況下,，對于自噬的研究，除了發(fā)生的機制本身外,，更多的是將自噬與各種生命活動或者疾病結(jié)合起來,。比如研究自噬在腫瘤的發(fā)生發(fā)展，炎癥反應(yīng),，氧化應(yīng)激等不同生物學(xué)功能的作用,。
技術(shù)原理
       自噬是細胞受到刺激后吞噬自身的細胞質(zhì)或細胞器,，最終將吞食物在溶酶體內(nèi)降解的過程,。自噬體（自噬體）為雙層膜包被的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)，內(nèi)含細胞質(zhì),，長壽蛋白質(zhì)和異常蛋白聚集物,，損傷或多余細胞器如線粒體，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和微體,，病毒和細菌等,。
自噬過程：
       1、細胞接受自噬誘導(dǎo)信號后,，在胞漿的某處形成一個小的類似"脂質(zhì)體"樣的膜結(jié)構(gòu),，然后不斷擴張，被稱為Phagophore,。
       2,、Phagophore不斷延伸，將胞漿中的任何成分,，全部攬入,，然后"收口"，成為密閉的球狀的autophagosome,，即"自噬體",。
       3、自噬體形成后,，可與細胞內(nèi)吞的吞噬泡,、吞飲泡和內(nèi)體融合（這種情況不是必然要發(fā)生的）。
4,、自噬體與溶酶體融合形成autolysosome,，期間自噬體的內(nèi)膜被溶酶體酶降解,，2者的內(nèi)容物合為一體，自噬體中的"貨物"也被降解,，產(chǎn)物（氨基酸,、脂肪酸等）被輸送到胞漿中，供細胞重新利用,，而殘渣或被排出細胞外或滯留在胞漿中,。
實驗方法

技術(shù)總結(jié)
       一、自噬誘導(dǎo)劑
       1,、BredeldinA/Thapsigargin/Tunicamycin：模擬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
       2,、Carbamazepine/L-690，330/LithiumChloride（氯化鋰）：IMPase抑制劑（即Inositolmonophosphatase,，肌醇單磷酸酶）
       3,、Earle's平衡鹽溶液：制造饑餓
       4、N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：ClassIPI3KPathway抑制劑
       5,、Rapamycin：mTOR抑制劑
       6,、XestosponginB/C：IP3R阻滯劑
       二、自噬抑制劑
       1,、3-Methyladenine（3-MA）：（ClassIIIPI3K）hVps34抑制劑
       2,、BafilomycinA1：質(zhì)子泵抑制劑
       3、Hydroxychloroquine（羥氯喹）：Lysosomallumenalkalizer（溶酶體腔堿化劑）
除了選用上述工具藥外,，一般還需結(jié)合遺傳學(xué)技術(shù)對自噬相關(guān)基因進行干預(yù)：包括反義RNA干擾技術(shù)（Knockdown）,、突變株篩選、外源基因?qū)氲取?/div>