微核(micronucleus,簡稱MCN),也叫衛(wèi)星核,,是真核生物細(xì)胞在有絲分裂后期由于染色體片斷喪失著絲粒從而游離于細(xì)胞質(zhì)中的一種異常結(jié)構(gòu),,是染色體畸變的一種表現(xiàn)形式。微核是細(xì)胞有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時(shí),,仍留在細(xì)胞質(zhì)中的整條染色單體或染色體的無著絲粒斷片或環(huán),。這些片段或染色體在分裂末期不能進(jìn)入主核,在子細(xì)胞進(jìn)入下一次分裂間期時(shí),,便濃縮成主核之外的小核,,即微核。目前有輻射,、化學(xué)誘變劑等較多理化因素可引起染色體斷裂,,且均可導(dǎo)致細(xì)胞分裂從而產(chǎn)生微核現(xiàn)象。
一,、 微核試驗(yàn)的簡介
微核試驗(yàn)是一種建立在細(xì)胞水平上分析DNA損傷的技術(shù),,其目的是以微核作為遺傳毒性檢測(cè)終點(diǎn),用于檢測(cè)染色體斷裂劑及非整倍體誘導(dǎo)劑,,是目前公--認(rèn)的篩選致突變物的主要方法之一,,在化合物遺傳毒性評(píng)價(jià)系統(tǒng)中占據(jù)著重要的地位。
陰性對(duì)照
陽性對(duì)照
微核試驗(yàn)可分為體外微核及體內(nèi)微核試驗(yàn),,體外微核試驗(yàn)常以CHL,、V79及CHO-K1細(xì)胞作為試驗(yàn)系統(tǒng),而體內(nèi)微核試驗(yàn)使用較多的是嚙齒類動(dòng)物的嗜多染紅細(xì)胞(PCE)或者網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET),。PCE或RET是有絲分裂后期的紅細(xì)胞由幼年發(fā)展為成熟紅細(xì)胞過程中的一個(gè)階段,,此時(shí)紅細(xì)胞的主核已排出,而微核仍保留在細(xì)胞質(zhì)中并十分易于辨認(rèn),。因此,,嗜多染紅細(xì)胞或網(wǎng)織紅細(xì)胞是體內(nèi)微核試驗(yàn)的首-選細(xì)胞群,。
圖片來源:小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核的形成(Cole et al,1979,,1981)
二、 流式體內(nèi)微核檢測(cè)
除了人工閱片等常規(guī)檢測(cè)方法外,,流式細(xì)胞術(shù)等自動(dòng)化檢測(cè)方法也被用于微核檢測(cè),。流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry)檢測(cè)方法是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的定量測(cè)定細(xì)胞和亞細(xì)胞成分的方法。該方法通過流式細(xì)胞儀以激光束為光源,,將待測(cè)樣品進(jìn)行熒光染色,,然后在液體載體里將單個(gè)細(xì)胞通過激光束產(chǎn)生的熒光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),最終通過儀表顯示來達(dá)到定量測(cè)定的目的,。
利用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行體內(nèi)微核鑒定則是由于與成熟的紅細(xì)胞相比,,未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞仍然含有RNA和某些表面蛋白質(zhì)(比如轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,也稱為CD71),,因此可用RNase降解RNA以排除RNA的干擾,,且不同抗體可用于區(qū)分不同細(xì)胞或成分,如CD71抗體可區(qū)分網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞,,CD61抗體可用于排除血小板的干擾,,而后可用PI染液對(duì)DNA進(jìn)行染色,從而輕易鑒別出微核,。流式體內(nèi)微核檢測(cè)流程如下:
三,、IPHASE相關(guān)產(chǎn)品
流式細(xì)胞術(shù)微核檢測(cè)具有檢測(cè)速度快、結(jié)果客觀可靠及可滿足高通量檢測(cè)要求等特點(diǎn),,因此,,IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者,憑借先進(jìn)的設(shè)備,,專業(yè)的技術(shù)人員和多年研發(fā)的經(jīng)驗(yàn),,現(xiàn)正在開發(fā)小鼠體內(nèi)微核試驗(yàn)流式檢測(cè)試劑盒。小鼠染毒處理后,,于不同時(shí)間點(diǎn)收集外周血,,便可用該試劑盒進(jìn)行流式微核檢測(cè)。試劑盒提供了用于小鼠外周血流式微核檢測(cè)的主要試劑,,包括抗凝劑,、RNase溶液、CD71,、CD61熒光抗體,、生物標(biāo)準(zhǔn)品及PI染液等,且試劑盒各組成成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè),,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,、可靠,、重現(xiàn)性好。
與體內(nèi)微核檢測(cè)試驗(yàn)一樣,,體外微核檢測(cè)在預(yù)測(cè)致癌危險(xiǎn)性,、檢測(cè)非整倍體誘發(fā)劑及其它遺傳危害方面也具有重要的地位。IPHASE現(xiàn)已開發(fā)出了包括采用人工閱片方法的體外微核試驗(yàn)試劑盒在內(nèi)的一系列專門用于體外遺傳毒性研究的產(chǎn)品,,助力廣大客戶進(jìn)行體外遺傳毒理學(xué)研究,。
名稱 | 規(guī)格 |
體外微核試驗(yàn)試劑盒 | 5mL*32 test |
遺傳毒性Ames試劑盒 | 100/150/200/250 dishes |
遺傳毒性Mini-Ames試劑盒 | 6孔板*24板/6孔板*40板 |
微量波動(dòng)Ames試劑盒 | 16*96 wells/ 4*384 wells |
UMU遺傳毒性試劑盒 | 96 wells |
TK基因突變?cè)噭┖?/span> | 20ml*36 test |
HGPRT基因突變?cè)噭┖?/span> | 20ml*36 test |
體外染色體畸變?cè)噭┖?/span> | 5mL*30 test |
彗星試驗(yàn)試劑盒 | 20/50 test |
便捷性
省去誘導(dǎo)S9制備、試劑配制的時(shí)間,,大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期,。
準(zhǔn)確性
試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,、可靠,、重現(xiàn)性高。
穩(wěn)定性
試劑盒穩(wěn)定性強(qiáng),、易于運(yùn)輸和保存,。
應(yīng)用廣
應(yīng)用范圍廣,可用于食品,、藥品,、化妝品、化學(xué)品,、醫(yī)療器械,、農(nóng)藥等的遺傳毒性研究。
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn),,推出了多領(lǐng)域,、多種類的高-端科研試劑,為藥物早期研發(fā)提供篩選工具,,為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料,、新方法和新手段,為食品,、藥品,、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,望廣大科研工作者咨詢,。
發(fā) 文 章 得 獎(jiǎng) 勵(lì)
凡使用本公司產(chǎn)品,,在國內(nèi)及國際刊物上發(fā)表論文(論文發(fā)表日起一年內(nèi)),并注明產(chǎn)品屬于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司所有,,即可申請(qǐng)獎(jiǎng)勵(lì),。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同,給予不同金額獎(jiǎng)品:
非SCI論文及IF≤5分,,500元禮品,;
5分<IF≤8分 800元,;
8分<IF≤10分 1000元;
IF≥10分 2000元,;
注:禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購買抵用券,;
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