體內(nèi)堿性彗星試驗(yàn)在化合物遺傳毒性評價中的應(yīng)用日益廣泛,。ICH S2(R1) 已將肝臟彗星試驗(yàn)列為第 2 個組織/終點(diǎn)的體內(nèi)試驗(yàn),;體內(nèi)哺乳動物堿性彗星試驗(yàn)的指導(dǎo)原則(TG489)也已頒布。體內(nèi)堿性彗星實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驒z測 DNA 鏈斷裂,、堿性不穩(wěn)定位點(diǎn),、不完整切除修復(fù)引起的 DNA 鏈的斷裂,能夠制成合適細(xì)胞懸液的組織 DNA 損傷,。與其他試驗(yàn)相比其檢測的是單細(xì)胞水平的 DNA 損傷,,因此該試驗(yàn)敏感性較高,,操作簡單,經(jīng)濟(jì)省時,。
一,、彗星試驗(yàn)原理
彗星試驗(yàn)(Comet Assay),亦稱單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn),,是一種通過檢測DNA鏈損傷判斷遺傳毒性的技術(shù),。它能有效地檢測并定量分析細(xì)胞中DNA單、雙鏈缺口損傷的程度,。當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損傷因子誘發(fā)細(xì)胞DNA鏈斷裂時,,其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細(xì)胞裂解液作用下,,細(xì)胞膜,、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì),、RNA以及其他成分均擴(kuò)散到細(xì)胞裂解液中,,而核DNA由于相對分子質(zhì)量太大只能留在原位。
在中性條件下,,DNA片段可進(jìn)入凝膠發(fā)生遷移,,而在堿性電解質(zhì)的作用下,DNA發(fā)生解螺旋,,損傷的DNA斷鏈及片段被釋放出來,。由于這些DNA的相對分子質(zhì)量小且堿變性為單鏈,所以在電泳過程中帶負(fù)電荷的DNA會離開核DNA向正極遷移,,從而形成彗星狀圖像,,而未受損傷的DNA部分則保持球形。因此,,可根據(jù)電泳緩沖液PH值不同,,進(jìn)一步分為中性彗星試驗(yàn)(PH=8.4)和堿性彗星試驗(yàn)(PH>13),前者主要用于檢測DNA雙鏈的斷裂損傷,,后者則具有更高的靈敏性,,可用于檢測更少量的單鏈和雙鏈的斷裂損傷。
通常,,DNA受損越嚴(yán)重,,其產(chǎn)生的斷鏈和斷片就越多,長度也越小,,在相同電泳條件下遷移的DNA量就越多,,遷移距離也越長。因此,,可通過測定DNA遷移部分的光密度或長度來判定單個細(xì)胞的DNA損傷程度,,從而確定受試物的作用劑量與DNA損傷效應(yīng)的關(guān)系,。
陰性對照
陽性對照
二、IPHASE產(chǎn)品
IPHASE作為體外研究生物試劑引·領(lǐng)者,,針對堿性彗星試驗(yàn)成功開發(fā)彗星試驗(yàn)試劑盒及其相應(yīng)載玻片,,省去了客戶溶液配制時間,大大縮短了試驗(yàn)周期,,且試劑盒各組分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測和多次試驗(yàn)驗(yàn)證,,符合堿性彗星試驗(yàn)要求。
產(chǎn)品名稱 規(guī)格
彗星試驗(yàn)試劑盒 20/50 Test
彗星試驗(yàn)載玻片,,2孔 2/25 張
便捷性
提供單細(xì)胞凝膠電泳所需試劑和耗材,可以直接使用,,大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期,。
準(zhǔn)確性
試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,、可靠,、重現(xiàn)性高。
穩(wěn)定性
本試劑盒穩(wěn)定性強(qiáng),、易于運(yùn)輸和保存,。
應(yīng)用廣
應(yīng)用范圍廣,可用于食品,、化學(xué)品,、農(nóng)藥、消毒劑,、食品添加劑,、化妝品、醫(yī)療器械等多個方面的遺傳毒理學(xué)檢測,。
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn),,推出了多領(lǐng)域、多種類的高·端科研試劑,,為藥物早期研發(fā)提供篩選工具,,為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段,,為遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,。此外,IPHASE/匯智和源可提供特殊產(chǎn)品的定制服務(wù),,望廣大科研工作者咨詢,。
發(fā) 文 章 得 獎 勵
凡使用本公司產(chǎn)品,在國內(nèi)及國際刊物上發(fā)表論文(論文發(fā)表日起一年內(nèi)),,并注明產(chǎn)品屬于IPHASE BIOSCIENCES/匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司所有,,即可申請獎勵,。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同,給予不同金額獎品:
非SCI論文及IF≤5分,,500元禮品,;
5分<IF≤8分 800元;
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注:禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購買抵用券;
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