抗體（antibody,，Ab）是機(jī)體在體內(nèi)存在的外來(lái)分子,、微生物等抗原物質(zhì)刺激下，由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的,、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白（immunoglobulins,，Ig），主要分布在血清中,，也分布于組織液及外分泌液中,。
1 抗體的發(fā)展歷程
抗體技術(shù)是免疫學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)重要方面，在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)各學(xué)科得到了廣泛應(yīng)用,。隨著生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,，抗體技術(shù)也經(jīng)歷了三個(gè)發(fā)展階段,。
第一代抗體——血清多克隆抗體（PcAb）,早在20世紀(jì)初期已發(fā)現(xiàn)血清抗體和細(xì)菌毒素的作用，并用于多種疾病的治療,。雖然免疫動(dòng)物制備的血清抗體的免疫原性和非均質(zhì)性給抗體的研究和應(yīng)用造成困難,，但由于血清多克隆抗體識(shí)別抗原的廣譜性和識(shí)別不同表位的各種抗體或識(shí)別同種抗原表位的不同克隆的抗體可協(xié)同作用，因而能高效地識(shí)別抗原和阻斷抗原對(duì)機(jī)體的危害,，所以血清抗體至今仍不失為一種診治疾病和生命科學(xué)研究的有效制劑,。
1975年德國(guó)學(xué)者K?hler和英國(guó)學(xué)者M(jìn)ilstein合作研究，創(chuàng)立了雜交瘤技術(shù),，使第一代抗體發(fā)展到第二代抗體——單克隆抗體（McAb）,。該研究在仙臺(tái)病毒介導(dǎo)下，將經(jīng)綿陽(yáng)紅細(xì)胞免疫后的小鼠脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞（P3-X63/Ag8）融合,，融合的細(xì)胞既獲得了親代脾細(xì)胞分泌特異性抗體的特性,，又具有骨髓瘤細(xì)胞大量繁殖的能力，成為了一種既能分泌特異性抗體又能長(zhǎng)命的雜交瘤細(xì)胞,。這一具有劃時(shí)代意義的新技術(shù),，為抗體的分子生物學(xué)研究提供了一個(gè)新的手段，同時(shí)也為所有需要制備和應(yīng)用抗體的領(lǐng)域提供了一個(gè)全新的方法,，極大的促進(jìn)了免疫學(xué),、遺傳學(xué)、微生物學(xué),、分子生物學(xué)和基礎(chǔ)與臨床醫(yī)學(xué)等學(xué)科的發(fā)展,，受到很多學(xué)者的極大關(guān)注。
20世紀(jì)80年代,，在充分認(rèn)識(shí)免疫球蛋白（Ig）基因結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)上,，人們利用DNA重組技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，對(duì)Ig分子進(jìn)行基因水平的切割,、拼接或修飾,，重新組裝成新型的抗體分子，成為了繼多克隆抗體,、單克隆抗體之后的第三代抗體——基因工程抗體（GEAb）,。基因工程抗體保留了天然抗體的特異性和主要的生物學(xué)活性,，去除或減少了無(wú)關(guān)結(jié)構(gòu),，是目前抗體應(yīng)用研究的技術(shù)，且使得抗體的人源化以及制備人抗體成為可能,，大大促進(jìn)了抗體技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展,。
2 抗體分子的基本結(jié)構(gòu)
2.1 重鏈和輕鏈
抗體由四條多肽鏈組成，即兩條相同的相對(duì)分子質(zhì)量較小的輕鏈（light chain,，L鏈）和兩條相同的相對(duì)分子質(zhì)量較大的重鏈（heavy chain,，H鏈）借二硫鍵連接組成的對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu),。
輕鏈由214個(gè)氨基酸殘基組成，分子質(zhì)量約25kDa,。根據(jù)輕鏈氨基酸組成和排列順序不同（抗原性的差異）,，可將輕鏈分為兩種類(lèi)型，即kappa（k）鏈和lambda（λ）鏈,，故免疫球蛋白也可分為兩種類(lèi)型,，即k型和λ型。同一個(gè)天然Ig分子上輕鏈的類(lèi)型是相同的,，但同一機(jī)體內(nèi)可存在兩種類(lèi)型的抗體分子,。每條輕鏈含有兩個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽。
重鏈大小約為輕鏈的2倍,，含450~550個(gè)氨基酸殘基,，分子質(zhì)量約為55~75 kDa。不同的H鏈由于氨基酸組成和排列順序以及二硫鍵的數(shù)目和位置不同,，其抗原性也不同,，根據(jù)H鏈抗原性的差異可將其分為5類(lèi)，即μ鏈,、γ鏈,、α鏈、δ鏈和ε鏈,。每條H鏈含有4~5個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽,，其中γ鏈、α鏈和δ鏈上含有4個(gè)環(huán)肽,，μ鏈和ε鏈含有5個(gè)環(huán)肽,。
圖1 抗體結(jié)構(gòu)示意圖
2.2 恒定區(qū)和可變區(qū)
通過(guò)對(duì)不同免疫球蛋白H鏈和L鏈的氨基酸序列比較發(fā)現(xiàn)，其氨基端（N端）約110個(gè)氨基酸序列變化很大,，稱(chēng)為可變區(qū)（variable region，V區(qū)）,，而羧基末端（C端）則相對(duì)穩(wěn)定,，變化很小，稱(chēng)為恒定區(qū)（constant region,，C區(qū)）（見(jiàn)圖2）,。
圖2 抗體分子的基本結(jié)構(gòu)
可變區(qū)位于L鏈靠近N端的1/2（含108~111個(gè)氨基酸殘基）和H鏈靠近N端的1/5（γ、α和δ）或1/4（μ和ε）,。L鏈和H鏈的V區(qū)分別為VL和VH,。在每個(gè)V區(qū)中均有一個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵連接形成的肽環(huán)，每個(gè)肽環(huán)含67~75個(gè)氨基酸殘基,。VL和VH中某些局部區(qū)域的氨基酸組成和排列順序具有更高的變異程度,，稱(chēng)為高變區(qū)（hypervariable region,，HVR）。VL和VH中的高變區(qū)各有三個(gè),，分別稱(chēng)為HVR1,、HVR2和HVR3，也可稱(chēng)為CDR1,、CDR2和CDR3,，一般CDR3具有更高的變異程度。在V區(qū)中非HVR部分的氨基酸組成和排列相對(duì)比較保守,，稱(chēng)為骨架區(qū)（framework region,，F(xiàn)R），VL和VH中的骨架區(qū)各有4個(gè),，分別用FR1,、FR2、FR3和FR4表示,。骨架區(qū)對(duì)于維持CDR的空間構(gòu)型具有重要作用,。V區(qū)氨基酸的組成和排列隨抗體結(jié)合抗原的特異性不同有較大的變異。由于V區(qū)中氨基酸組成和排列順序千變?nèi)f化,，故可形成許多種具有不同結(jié)合抗原特異性的抗體,。
恒定區(qū)位于L鏈靠近C端1/2和H鏈靠近C端3/4（γ、α和δ）區(qū)域或4/5（μ和ε）區(qū)域,。L鏈和H鏈的C區(qū)分別為CL和CH,。H鏈每個(gè)功能區(qū)含110多個(gè)氨基酸殘基，含有一個(gè)由二硫鍵連接的50~60個(gè)氨基酸殘基組成的肽環(huán),。這個(gè)區(qū)域氨基酸的組成和排列在同一種屬動(dòng)物所有個(gè)體的同一類(lèi)免疫球蛋白具有相同的抗原特異性,。不同抗原的IgG類(lèi)抗體其可變區(qū)不同，但恒定區(qū)相同,。同一抗原的不同類(lèi)型抗體,，其可變區(qū)形同，但恒定區(qū)不相同,，表現(xiàn)為類(lèi),、亞類(lèi)或型、亞型的差別,。
故根據(jù)抗體與抗原的結(jié)合位置,，抗體結(jié)構(gòu)可分為兩部分（見(jiàn)圖3）：即“Y"字型頭部的特異性結(jié)合抗原位點(diǎn)的Fab段和尾部相對(duì)保守的Fc段?？贵w的特異性體現(xiàn)在Fab段,，F(xiàn)ab段的抗原結(jié)合位點(diǎn)可與細(xì)胞上的抗原決定簇發(fā)生特異性的結(jié)合反應(yīng)。
圖3 抗體分子的基本結(jié)構(gòu)
3 抗體的種類(lèi)和特性
抗體是具有共同結(jié)構(gòu)和功能形式的一大類(lèi)糖蛋白,。根據(jù)重鏈類(lèi)型不同,，可將抗體分成五類(lèi),，即IgG、IgM,、IgA,、IgE和IgD，見(jiàn)表1和圖4,。
表1 不同抗體類(lèi)型特點(diǎn)比較表
圖4 不同類(lèi)型抗體結(jié)構(gòu)圖
4 IPHASE抗體產(chǎn)品
IPHASE憑借多年的產(chǎn)品自主研發(fā)經(jīng)驗(yàn),，不斷擴(kuò)充了本公司抗體產(chǎn)品類(lèi)別，現(xiàn)已形成一大批高質(zhì)量的抗體產(chǎn)品,，主要涉及到CD分子抗體,、細(xì)胞因子抗體、受體抗體和免疫檢查點(diǎn)蛋白抗體四類(lèi),，可用于多個(gè)領(lǐng)域的研究,，如免疫組化、免疫熒光,、免疫印記,、酶聯(lián)免疫、流式細(xì)胞術(shù),、免疫細(xì)胞化學(xué),、免疫沉淀和細(xì)胞分選等。
CD分子抗體 CD3,、CD4,、CD8、CD11,、CD19,、CD20、CD34,、CD45,、CD56、CD138,、CD271等
細(xì)胞因子抗體 IL-6,、IL-17A、TSLP等
受體抗體 IL-4R,、IL-6R、VEGFR2等
免疫檢查點(diǎn)蛋白抗體 B7H3,、PD-1,、PD-L1等
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，推出了多領(lǐng)域,、多種類(lèi)的科研試劑,，為藥物早期研發(fā)提供篩選工具,，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段,，為遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,。此外，IPHASE/匯智和源可提供特殊產(chǎn)品的定制服務(wù),，望廣大科研工作者咨詢(xún),。
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