磁珠分選,也被稱(chēng)為免疫磁珠細(xì)胞分選,,包括使用針對(duì)特定細(xì)胞表面抗原的抗體標(biāo)記細(xì)胞進(jìn)行選擇或去除,。被標(biāo)記的細(xì)胞與磁珠交聯(lián),一旦被置于磁場(chǎng)中,,即可被吸附,。
免疫磁珠分選有兩種方式:有柱式分選和無(wú)柱式分選。
操作磁珠分選有哪些要求
1 移液槍吸取液體要準(zhǔn)確
2 移液槍的槍頭在吸取磁珠或者抗體的時(shí)候,,槍頭要?jiǎng)偤蒙爝M(jìn)液面以下,,不要伸到瓶子底部,以免槍頭沾了過(guò)多的試劑,,再帶到了細(xì)胞懸液中
3 磁珠使用前要渦旋混勻
4 磁極插入細(xì)胞懸液5min之后,,轉(zhuǎn)移細(xì)胞的時(shí)候,特別是最后一滴細(xì)胞懸液,,如果滴不下來(lái),,不要晃動(dòng)磁極,這樣會(huì)降低細(xì)胞和磁極的吸附,,進(jìn)而降低純度,。或者最后一滴細(xì)胞可以不要,。
5 細(xì)胞和磁珠,,以及細(xì)胞和抗體的孵育時(shí)間,以及分選的步數(shù)請(qǐng)遵循protocol,,因?yàn)閜rotocol是經(jīng)過(guò)優(yōu)化的方案,。
6重復(fù)一次分選可提高收率,對(duì)純度影響不大,。每分離一次,,收益率通常會(huì)增加約8-10%,純度降低1-2%,。
7 Mojosort Buffer需要提前插入冰中預(yù)冷,。
8 磁極下面有一部分沒(méi)有磁極,,注意把流式管往上頂一頂,使得細(xì)胞懸液充分在磁極區(qū)域,。
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