試劑盒是用于盛放檢測化學(xué)成分,、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子,。一般醫(yī)院,、制藥企業(yè)使用。
ELISA大致分為五種類型：直接法,、間接法,、競爭法、夾心法,、捕獲包被法,。在商品化試劑盒中用得比較多的是雙抗體夾心法、競爭法和間接法,。
夾心法
雙抗體夾心法是夾心法中的一種主要形式,，夾心法分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法：
雙抗體夾心法中抗原的2個不同的抗原表位被兩個抗體-捕捉抗體和檢測抗體,，分別結(jié)合。捕捉抗體固定于載體即酶標(biāo)板上,，檢測抗體通過結(jié)合抗原進(jìn)行顯色分析,。
應(yīng)用于雙抗體夾心法檢測的捕捉抗體通常是單抗，偶爾有用多抗做為捕捉抗體的情況,，但很少見,，因?yàn)橐远嗫棺鳛椴蹲娇贵w容易出現(xiàn)交叉反應(yīng)而降低特異性。
檢測抗體通常為多抗,，在商業(yè)化的科研試劑盒中經(jīng)常用到生物素標(biāo)記的山羊多抗,，再讓生物素標(biāo)記的多抗與HRP標(biāo)記的親和素或者鏈霉親和素結(jié)合，然后再加HRP也就是辣根過氧化物酶的底物,，通常是TMB反應(yīng)顯色,，這種方法是在傳統(tǒng)的HRP酶標(biāo)記抗體的雙抗體夾心法ELISA中引入了生物素-親和素放大系統(tǒng)。
競爭法
競爭法也是一種很常用的方法,，一起看看：
競爭法是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競爭性結(jié)合的分析方法,。當(dāng)游離抗體(或抗原)濃度越高，則能與固定抗原(或抗體)結(jié)合的酶標(biāo)抗體(或抗原)就越少,，后續(xù)顯色就越淺,，即與對照相比，顯色越淺,，表示檢測樣本中抗體(或抗原)含量越高,。
該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測也可用于檢測比較不純的樣本，且重復(fù)性好,，但是檢測的靈敏度和專一性較差,。競爭法測抗原常用于檢測小分子抗原及半抗原，這類抗原通常缺乏兩個以上的識別位點(diǎn),，不適用于雙抗夾心法進(jìn)行測定,。該方法在商業(yè)化試劑盒中被廣泛運(yùn)用。
間接法
間接法只能用于測定抗體,，主要用于疾病的診斷,，其優(yōu)點(diǎn)是只需要改變包被抗原，酶標(biāo)抗體是通用的,。間接法使用了二抗增加信號強(qiáng)度,，也使抗體的選擇多樣化，然而間接法容易產(chǎn)生交叉反應(yīng),。
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