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遺傳毒性試驗(yàn)是評(píng)估藥物遺傳毒性的常用方法

閱讀:3303      發(fā)布時(shí)間:2020-8-23
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  遺傳毒性試驗(yàn)是一種使用哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,細(xì)菌,酵母或真菌的測(cè)試,,以確定測(cè)試樣品是否引起基因突變,,染色體結(jié)構(gòu)畸變以及其他DNA或基因變化。進(jìn)行測(cè)試時(shí),,應(yīng)在至少兩次測(cè)試中使用哺乳動(dòng)物細(xì)胞來(lái)研究不同的測(cè)試終點(diǎn),,從而確定醫(yī)療器械(包括口腔器械))生物(口腔)材料和/或其提取物引起遺傳的能力損害和遺傳變化。這是遺傳毒理學(xué)研究的重要內(nèi)容,。它可以檢測(cè)藥物是否具有誘變,,異常和致癌作用,它是檢測(cè)基因突變和評(píng)估藥物遺傳毒性的常用方法之一,。
  遺傳毒性試驗(yàn)的原理:鼠傷寒沙門氏菌菌株(TA系列)是組氨酸缺陷型突變體,,也就是說(shuō),它們失去了合成組氨酸的能力,,因此無(wú)法在無(wú)組氨酸的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),。如果測(cè)試物質(zhì)是誘變劑,則可以誘導(dǎo)菌株逆向突變并恢復(fù)合成組氨酸的能力,,從而在缺乏組氨酸的堿性培養(yǎng)基中生長(zhǎng),。菌落的數(shù)量反映了被測(cè)物質(zhì)的致突變性。
  染色體畸變包括染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)值畸變,由外源因素(例如破壞劑)誘導(dǎo)的染色體或染色體斷裂進(jìn)一步導(dǎo)致染色體缺失和重排,。常見(jiàn)的類型包括骨折,,碎片,缺失,,原位,,移位等。在體外,,在存在或不存在體外代謝活化的情況下,,將哺乳動(dòng)物細(xì)胞暴露于不同濃度的測(cè)試物質(zhì)。一定時(shí)間后,,用秋水仙堿處理細(xì)胞,,使更多的有絲分裂細(xì)胞終止于中期。收集細(xì)胞進(jìn)行吉姆薩染色,,以觀察染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目畸變,。應(yīng)建立至少3個(gè)測(cè)試劑量,溶劑對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組,。
  遺傳毒性試驗(yàn)是檢測(cè)破損劑或有絲分裂毒物的有效方法,。在細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中,由于紡錘體功能障礙而形成的染色體結(jié)構(gòu)破壞或染色體滯后導(dǎo)致的染色體片段由于紡錘體牽引力的損失而全部保留在細(xì)胞質(zhì)中,,形成了與核染色一致的染色體,,稱為微核。嚙齒類動(dòng)物的骨髓中多色紅細(xì)胞(PCE)的微核試驗(yàn)是常用的,。用測(cè)試物質(zhì)處理嚙齒動(dòng)物,,然后殺死。取出骨髓,,切片,,固定并染色。在顯微鏡下計(jì)數(shù)PCE中的微核,。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可以更模擬體內(nèi)測(cè)試物質(zhì)的轉(zhuǎn)化過(guò)程,。因此,體內(nèi)微核試驗(yàn)常被用作國(guó)內(nèi)外藥物,,食品和化學(xué)藥品遺傳毒性評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)組合之一,。
 

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