三國時代,，諸侯爭霸,，群雄逐鹿
周瑜更是風度翩翩、文武雙全,，
全江東公瑾女孩的老公,，
只可惜，到底諸葛孔明略勝*,，
公瑾終飲恨江東,。
pDＮA的純化方案已經日漸成熟，
常規(guī)方法亦可以滿足目前的需求,，
奈何,，偏偏又沖出一匹黑馬，
以“省時,、省力,、省錢”獲得業(yè)內人士交口稱贊
雖然常規(guī)方法還算出色，
但依然不禁讓人發(fā)出“既生瑜何生亮”之嘆,。
話說這位洋“孔明”,，生于一戶洋人家族：
BIA Separations，
更有一個洋氣的名字：
BIA•整體柱•pDＮA純化方案
對決：今天小編就帶大家來看一場高手之間的
周瑜－常規(guī)方法
VS
諸葛孔明－BIA•整體柱•pDＮA純化方案
| 周瑜－常規(guī)方法 | 諸葛亮－BIA整體柱純化 | 整體柱純化方案的優(yōu)勢 | |
| 純化步驟及流程對比 | |||
| 步驟 | 三步法 | 兩步法 | þ 步驟少 þ 裂解流程更加符合藥品的生產標準 þ 純化后的質粒純度一樣 þ 減少了分子篩的需求 þ 省時,、省力,、省錢 |
| 優(yōu)化的前期處理 | 必須要用中空纖維柱濃縮樣品 | 堿裂解法，CaCl2沉淀蛋白質和RNA | |
| 分子篩：去除RNA,，同時將緩沖液置換為疏水柱緩沖液 | |||
| 第二步 | 疏水柱：分離開環(huán)DNA | DEAE離子柱：分離去除RNA,，雜蛋白，內毒素等 | |
| 第三步 | 離子柱：分離雜蛋白,，內毒素等 | C4柱：分離開環(huán)DNA | |
| 純化成本對比 （以200mg小規(guī)模為例） | |||
| 所需耗材 | 10L分子篩 | 80ml套裝柱 | þ 總體成本可降低50% þ 規(guī)模越大,，成本降低越多 þ GMP級別的接頭，更符合GMP標準 þ 輕松放大,，避免了裝填驗證帶來的煩惱 |
| 100ml疏水柱 | |||
| 100ml離子柱 | |||
| GMP接頭 | 1L以下的層析沒有GMP級別的接頭，不符合GMP的標準,。 | 從8ml開配有GMP級別的接頭 | |
| 純化效果 （相同的純化體積,，相同的洗脫方法，相同上樣體積） | |||
| DEAE離子柱純化的效果,，質粒的純度已經達到90%以上 | 不言而喻 | ||
| 疏水柱 | 常規(guī)疏水柱回收率和純度不如BIA的C4整體疏水柱 | C4整體疏水柱的回收率和純度要高于常規(guī)疏水柱 | |
各位做過pDNA純化的老鐵們,，
說句心底話，
全面碾壓有木有,？
大寫的“省時,、省力、省錢”有木有,？
話不多說,，繼續(xù)上圖
BIA 整體柱兩步法質粒純化工藝流程總覽
各位做過pDNA純化的老鐵們，
圖看懂了嗎？
至于常規(guī)方法的效率,，
是不是配得上
它將近二倍于BIA整體柱純化方案的價格,，
我就說兩句話:
一分錢一分貨，
三分錢五分貨,，
五分錢十分貨,；
BIA的純化結果已經證明了，
一張整票勝過一把零錢,
一個整體柱搞定一切……
后的后,，
要感謝一個人,，
那位pNDA純化大神小哥哥，
無私地貢獻出對比數據,，
才有了今天精彩的*打架!
請收下小編的膝蓋
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