多肽在-20℃很穩(wěn)定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,,在將它們暴露于空氣之前,, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。
這將是濕度影響減少,,當(dāng)無法冷凍干燥時,,好的方法是以小的工作樣量存放。 對于含Cys, Met orTrP的多肽,,脫氧緩沖劑對其溶解不可少,,因為這種多肽可易空氣氧化, 在封瓶前,,慢慢流過多肽的氮氣或氬氣也會降低氧化作用,。
含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有這些肽與不含這些有問題解苷的那些肽相比,,生命期有限,。
多肽的保存和操做
包裝 1mg或更少的多肽按凈重包裝,聲明的小瓶重不含相關(guān)抗離子和水,。 例如,,氨基酸分析決定的肽含量是80%, 在1mg樣品中,,那么瓶中毛重是1.25mg,。大量的多肽以毛重算。標(biāo)出的重量含相關(guān)抗離子和水,, 例如,,25mg樣品中肽百分比為90%,那么,,實際肽量為25mg×90%=22.5mg,,不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%,, 而肽含量相關(guān)帶電基團(tuán)(如Arg, Lys )的抗離子量和肽新水性決定。這是合成肽的本身特性,。
凍干肽的保存
所有產(chǎn)品應(yīng)存于冰箱, 最好為-20℃,。多數(shù)肽以此方法可以存放幾年不變,。
肽溶液的保存
溶液肽遠(yuǎn)比凍干形式不穩(wěn)定,溶液應(yīng)為中性pH(pH5-7), -20℃保存的,,為避免樣品的反復(fù)凍融,, 最好分成小樣存放。一份樣品融凍后未用完,, 應(yīng)扔掉,,細(xì)菌降解有時會成為溶液肽的麻煩,, 因此肽應(yīng)溶于無菌水,, 或肽溶液用0.2μ M濾膜過濾。
多肽應(yīng)用和保存
多肽具廣泛的溶解性,。多肽不溶的主要問題是形成二級結(jié)構(gòu),。除了最太肽外,這點都會發(fā)生,, 在有多重疏水殘基的肽中更顯著,。鹽會促進(jìn)二級結(jié)構(gòu)形成。我們建議先在無菌蒸餾水或去離子中溶解多肽,。
如需要增加溶解率,, 可用聲處理。溶解仍有問題,, 加少量稀乙酸(10%)或氨水,,會便于溶解。要長期保存多肽,, 最好冷凍干燥,,冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無降解。
溶液中的多肽極不穩(wěn)定,。 多肽易受細(xì)菌降解,,應(yīng)用無菌純化水溶解。含有Met, Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化,,壽命有限,。應(yīng)溶于無氧溶劑, 為防止重復(fù)凍融的破壞,, 建議溶解少量的肽以便實驗,,其余多肽以固體形成保存。
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