在多肽合成儀中,,在線檢測耦合效果的裝置,,如UV Monitor往往是選配裝置,客戶可根據(jù)實驗的需要選購,。其功能是讓操作者直觀的看到多肽合成的每一部氨基酸偶聯(lián)效果,,從而針對特定的序列做合成設置的調(diào)整,最終達到最佳合成效果,。
對于不熟悉多肽合成儀操作的用戶來說,,UV Monitor是相當重要的。
試劑檢測:沒有選購在線檢測附件的多肽合成儀用戶,,也可以采用試劑檢測方法做基本的耦合效果測定實驗,。
固相多肽合成中,主要是通過檢測樹脂上游離氨基來判斷連接效率,,檢測方法稱為Kaiser方法,,其檢測結(jié)果,如果有游離氨基的時候,,顯示蘭色,,或紅褐色(pro,ser,His),。
Kaiser試劑包括:A,,6% 茚三酮的乙醇溶液;B,,80% 苯酚的乙醇溶液,;C,2% 0.001M KCN的吡啶溶液,。
配制中的吡啶需要經(jīng)過茚三酮處理后,,重蒸后再使用。檢測過程,,取少量樹脂,,加入A,B,,C各2-3滴,100℃下加熱1-2min,,如果溶液有蘭色,,或樹脂出現(xiàn)蘭色,紅褐色,,表明還有游離氨基,,否則說明連接*。
其它檢測游離氨基的方法:三硝基苯磺酸法,,溴芬蘭法等,。
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