多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理,，在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序(序列,，一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應(yīng),、合成,，操作最終得到多肽載體。固相合成法,，大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生，參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的,。羧基端是游離的,，并且在反應(yīng)之前必須活化。固相合成方法有兩種,，即Fmoc和tBoc,。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)在大多采用Fmoc法合成，但對(duì)于某些短肽,，tBoc因其產(chǎn)率高的優(yōu)勢(shì)仍然被很多企業(yè)所采用,。
多肽合成儀具體合成由下列幾個(gè)循環(huán)組成：
1) 去保護(hù)：Fmoc保護(hù)的柱子和單體必須用一種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護(hù)基團(tuán)。
2) 激活和交聯(lián)：下一個(gè)氨基酸的羧基被一種活化劑所活化,?；罨膯误w與游離的氨基反應(yīng)交聯(lián)，形成肽鍵,。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使反應(yīng)完成,。循環(huán)：這兩步反應(yīng)反復(fù)循環(huán)直到合成完成。
3) 洗脫和脫保護(hù)：多肽從柱上洗脫下來,，其保護(hù)基團(tuán)被一種脫保護(hù)劑(TFA) 洗脫和脫保護(hù),。
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