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上海登寧帶您了解超濾離心管常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法
閱讀：2560 發(fā)布時(shí)間：2023-2-17超濾離心管是實(shí)驗(yàn)中用到的器皿,，使用過(guò)程中經(jīng)常會(huì)遇到一些問(wèn)題,，上海登寧總結(jié)了以下常遇到的問(wèn)題及其解決方法,，我們一起去看下吧！
離心管是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀,。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了,分子量比它大的就截留在上面（即內(nèi)管中）,就是超濾的原理.常用于濃縮樣品,。
超濾離心管的分子量選擇：
按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管，為了得到zui高的收率，所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,，不超過(guò)目標(biāo)分子量的一半,。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑，膜上的孔并非均勻,，離心高壓下也可能滲漏,，因此截留孔徑越小，流速越慢但截留比例更大,。如果樣本濃度低體積大,，可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),，可將待濃縮樣品稀釋到超濾管zui大容積再離心,，重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間或者過(guò)速離心,，雖然高品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),，可避免過(guò)度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過(guò)度濃縮,，zui終體積越小,，越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,，必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,，有助于減少膜表面吸附，能提高回收率,。盡量避免Tips接觸膜表面,。
超濾離心管是否要預(yù)處理：
超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,，不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來(lái)說(shuō)(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附zui小化,，但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問(wèn)題,。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面,。對(duì)超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,，大多數(shù)情況下，在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,，因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn),。鈍化的方法是預(yù)先用zui高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時(shí)以上，蒸餾水沖洗柱子,，再用蒸餾水離心一次除去可能殘留在膜上的鈍化溶液,。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用,，需要加無(wú)菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn),。
常用的鈍化溶液可選擇：
1,、1％牛血清白蛋白磷酸緩沖液溶液
2、5％十二烷基磺酸鈉蒸餾水水溶液
3,、5％Tween-20非離子活性劑蒸餾水溶液
4,、5％Triton-X 蒸餾水溶液
5、5％聚乙二醇化合物蒸餾水溶液
6,、1％免疫球蛋白IgG磷酸緩沖液溶液
超濾離心管因?yàn)樾枰咚匐x心,，某些對(duì)剪切力或壓力誘導(dǎo)下易變性的不穩(wěn)定樣品可能不太適合。另外超濾膜上孔徑是平均孔徑,，膜容易堵,，對(duì)于有微小顆粒或者碎片的樣品,，先用較大孔徑的超濾管過(guò)濾一次,，再進(jìn)行下一步濃縮。
超濾離心管是否可以重復(fù)使用：
離心超濾管通常不能消毒再次性使用,。由于單管價(jià)格并不便宜,，不少人嘗試重復(fù)使用----經(jīng)驗(yàn)是用蒸餾水清洗膜表面多次，離心一次到兩次,，那種可以反向離心的小管子可以加蒸餾水浸泡后反向多離心一次,，會(huì)好些?？芍貜?fù)用于同一樣品,，不用時(shí)可用蒸餾水浸泡，但是要防止細(xì)菌污染,。不同樣品就不要混用了,。有人說(shuō)泡在20%酒精、1N的NaOH（氫氧化鈉）中,，防止長(zhǎng)菌,，而且防干，只要超濾膜侵了水,，就不可以再讓它干,，但也有人說(shuō)會(huì)破壞膜結(jié)構(gòu)。反正廠家一般不支持重復(fù)用,。多次重復(fù)使用會(huì)堵塞濾膜上的孔徑,，甚至出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
上海登寧科技有限公司是國(guó)內(nèi)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)過(guò)濾材料提供商,，致力于將質(zhì)量、可靠性和操作性突出的產(chǎn)品帶給每一位客戶。公司產(chǎn)品包括各類濾紙,、濾膜,、濾器以及輔助器材，普遍應(yīng)用于生命科學(xué),，農(nóng)業(yè),，藥物醫(yī)學(xué)，化工,，食品,，水質(zhì)分析，環(huán)境監(jiān)測(cè)等各個(gè)領(lǐng)域,，公司與各廠家建立了穩(wěn)定的合作關(guān)系,，確保品質(zhì)的同時(shí)更可以滿足客戶對(duì)于便捷和實(shí)惠的需求。