詳細(xì)介紹
▎ 斑馬魚黑色素(ML)定量檢測試劑盒ELISA用途
該試劑盒采用競爭法檢測血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中ML的濃度,。
▎ 檢測原理
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗斑馬魚黑色素(ML)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,,加入斑馬魚黑色素(ML)校準(zhǔn)品和待測樣本,,再加入HRP標(biāo)記的斑馬魚黑色素(ML)抗原(酶標(biāo)抗原),經(jīng)過溫育與充分洗滌,,去除未結(jié)合的組分,,在微孔板固相表面形成固相抗體-酶標(biāo)抗原的免疫復(fù)合物。加底物A和B,,底物在HRP催化下,,產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,,最終轉(zhuǎn)化為黃色,,在酶標(biāo)儀450nm波長上測定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測樣品中斑馬魚黑色素(ML)的濃度負(fù)相關(guān),。擬合校準(zhǔn)品曲線,,可以計(jì)算出樣本中斑馬魚黑色素(ML)的濃度。
反應(yīng)類型 | 競爭法 |
規(guī)格 | 96T/48T |
中文名稱 | 斑馬魚黑色素(ML)定量檢測試劑盒ELISA |
反應(yīng)時(shí)間 | 1.5 h |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫吸附測定 |
檢測范圍 | 0.25 ng/ml - 8 ng/ml |
靈敏度 | 0.1 ng/ml |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類型 | 血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清或其他生物樣本 |
▎ 特異性
可檢測樣本中的 ML, 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng),。
▎ 重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%,。
▎ 標(biāo)曲圖
▎ 批內(nèi)差
取同批次試劑盒對低,、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,,每份樣本連續(xù)測定20次,,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
▎ 批間差
選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對低、中,、高值定值樣本定量測定,,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值
▎ 精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示,。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
▎ 穩(wěn)定性
經(jīng)測定,,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%,。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度,、濕度及溫育條件,。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。
▎ 試劑盒的組成
▲未開封試劑盒,,4℃保存,;已開封,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,,酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存,,其他4℃保存。
英文名稱 | 中文名稱 | 規(guī)格 | 規(guī)格 |
Microe isa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T |
Standard | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 |
HRP-Corjugate | HRP標(biāo)記抗體 | 10mL | 5mL |
Sample Diluent | 稀釋液 | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL |
Stop Solution | 終止液 | 6mL | 3mL |
20× Wash Solution | 20×濃縮洗滌液 | 25mL | 15mL |
Product Description | 說明書 | 1份 | 1份 |
Sealing film | 封板膜 | 2張 | 2張 |
▎ 實(shí)驗(yàn)所需自備物品
1,、450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)
2,、高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4,、蒸餾水或去離子水.
5,、脫脂棉吸水紙.
6、37℃恒溫箱.
7,、100ml和1000ml量筒.