詳細(xì)介紹
▎ 斑馬魚5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒用途
該試劑盒采用競爭法檢測血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中斑馬魚5羥色胺(5-HT)的濃度,。
▎ 檢測原理
試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法,。采用生物素標(biāo)記5-HT,純化的抗MT抗體包被微孔板,,在競爭抑制反應(yīng)中,,一定量的固相抗體與生物素標(biāo)記5-HT及非標(biāo)記抗原(校準(zhǔn)品或標(biāo)本)進行抑制競爭反應(yīng),,抗體與生物素標(biāo)記的5-HT結(jié)合量受非標(biāo)記抗原量所抑制,非標(biāo)記抗原量多,抗體與生物素標(biāo)記的5-HT結(jié)合就少,,反之結(jié)合就多,;反應(yīng)平衡后,形成固相抗體-生物素化5-HT,,再加入酶標(biāo)記的親和素,,形成固相抗體-生物素化5-HT -酶標(biāo)-親合素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后,,用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),。隨著5-HT濃度的升高,OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系,。本試劑盒具有靈敏度高,、特異性強、重復(fù)性好,、操作簡單,、快速等特點,對血清中5-HT的減少或升高有可靠的檢出性能,。
反應(yīng)類型 | 競爭法 |
規(guī)格 | 96T/48T |
中文名稱 | 斑馬魚5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 |
反應(yīng)時間 | 1.5 h |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫吸附測定 |
檢測范圍 | 0.5 pg/mL – 16 pg/mL |
靈敏度 | 0.1pg/mL |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類型 | 血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清或其他生物樣本 |
▎ 特異性
可檢測樣本中的 5-HT , 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。
▎ 重復(fù)性
板內(nèi),,板間變異系數(shù)均<10%,。
▎ 標(biāo)曲圖
▎ 批內(nèi)差
取同批次試劑盒對低、中,、高值定值樣本進行定量檢測,,每份樣本連續(xù)測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值,。
▎ 批間差
選取3個不同批次的試劑盒分別對低,、中、高值定值樣本定量測定,,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值
▎ 精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
▎ 穩(wěn)定性
經(jīng)測定,,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,,尤其是實驗室內(nèi)溫度,、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差,。
▎ 試劑盒的組成
▲未開封試劑盒,,4℃保存;已開封,,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,,酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存,其他4℃保存,。
英文名稱 | 中文名稱 | 規(guī)格 | 規(guī)格 |
Microe isa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T |
Standard | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 |
HRP-Corjugate | HRP標(biāo)記抗體 | 10mL | 5mL |
Sample Diluent | 稀釋液 | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL |
Stop Solution | 終止液 | 6mL | 3mL |
20× Wash Solution | 20×濃縮洗滌液 | 25mL | 15mL |
Product Description | 說明書 | 1份 | 1份 |
Sealing film | 封板膜 | 2張 | 2張 |
▎ 實驗所需自備物品
1,、450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)
2、高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL.
3,、Eppendorf 移液器.
4,、蒸餾水或去離子水.
5、脫脂棉吸水紙.
6,、37℃恒溫箱.
7,、100ml和1000ml量筒.