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[動(dòng)物實(shí)驗(yàn)] - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)
一,、項(xiàng)目介紹
蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics） 一詞,，源于蛋白質(zhì)（Protein） 與 基因組學(xué)（Genomics） 兩個(gè)詞的組合，是大規(guī)模,、高通量地研究一個(gè)細(xì)胞,、組織或物種中表達(dá)的全套蛋白質(zhì)的學(xué)科?；诮陙碣|(zhì)譜技術(shù)的普及和發(fā)展,，蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的重要部分。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以對(duì)生物樣本中蛋白質(zhì)進(jìn)行大規(guī)模鑒定和定量,，進(jìn)而從高通量數(shù)據(jù)中挖掘有用信息,，為研究提供線索和方向。
目前蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域成熟的即為shotgun,，即從樣品中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)過還原,、烷基化,、酶解等步驟變?yōu)殡亩位旌衔铮俳?jīng)過電噴霧進(jìn)入質(zhì)譜中掃描,，得到質(zhì)譜圖,，通過軟件和數(shù)據(jù)庫進(jìn)行解析，得到相應(yīng)的蛋白質(zhì)信息,。
主要設(shè)備：質(zhì)譜儀 Thermo Q Exactive / AB Secix 5600+
二,、應(yīng)用
蛋白質(zhì)組學(xué)是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征，如表達(dá)水平,，蛋白間互作,，翻譯后修飾，從而發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育,、生長期和不同生理,、病理?xiàng)l件下的特點(diǎn),，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和疾病機(jī)理研究中有著重要作用。
三,、樣品保存運(yùn)輸
1,、膠點(diǎn)/膠條樣本
①蛋白量大于100ng,，4℃保存,，冰袋運(yùn)輸。
?、谑占瘯r(shí),，用雙蒸水對(duì)膠塊進(jìn)行清洗，采用干凈刀片將目的條帶區(qū)域（避免帶入空白或非目的區(qū)域）切下,，裝入EP管中保存,。
③考染膠條,，需要條帶肉眼清晰可見,，銀染膠條不建議進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定（銀染需質(zhì)譜兼容試劑盒銀染）。
?、懿煌瑮l帶不建議混合處理,，避免干擾。
?、萏峁颖緯r(shí)需提供膠塊考染圖和樣品取點(diǎn)圖,。
2、蛋白溶液樣本
?、俚鞍踪|(zhì)鑒定所需蛋白量至少大于10ug,，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融,。
②定量蛋白質(zhì)組學(xué)所需蛋白量大于100ug,，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融,。
?、坌揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)所欲蛋白量大于5mg，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融。
?、芙ㄗh測(cè)定蛋白濃度后,，液氮速凍,，避免蛋白降解，另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度,，方便實(shí)驗(yàn)室收到后進(jìn)行后續(xù)處理,。
⑤樣本若為IP實(shí)驗(yàn)后磁珠-抗體-蛋白復(fù)合物,，注意不要加入loading buffer,，應(yīng)采用wash buffer清洗后，離心去掉上清,，重復(fù)三次,，再使用PBS沖洗磁珠三次，去上清,，收集磁珠沉淀,。
3、細(xì)胞樣本
?、偌?xì)胞量1x107個(gè),，收集細(xì)胞沉淀，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融。
?、谑占瘯r(shí),，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分,，然后離心去除上清保存,。
4、血清樣本
?、贅颖玖?00uL,，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融。
?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血,。
5、血漿樣本
?、贅颖玖?00uL,，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融,。
?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。
6,、尿液樣本
?、贅颖玖?mL，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融。
?、跇悠窇?yīng)盡量避免帶入糞便殘?jiān)?br /> 7,、動(dòng)物組織樣本
①樣本量300mg,，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融,?！ ?br /> ②收集時(shí),，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面血液,，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時(shí)結(jié)冰,。
?、酃潭ㄒ航葸^的樣本無法進(jìn)行檢測(cè)。
8,、植物組織樣本
?、贅颖玖?00mg，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸,，避免反復(fù)凍融。
?、谑占瘯r(shí),，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙，并用濾紙吸干多余水分,，避免凍存時(shí)結(jié)冰,。
?、酃潭ㄒ航葸^的樣本無法進(jìn)行檢測(cè),。
9、微生物樣本
?、贅颖玖扛芍?00mg,，-80℃保存,，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融,。
?、谑占瘯r(shí)，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次,，去除培養(yǎng)基成分,，然后離心去除上清保存。
四,、結(jié)果展示
五,、價(jià)格列表
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