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[免疫熒光/IF] - FJB染色

染色機制

　　FJB染色的原理是FJB染液是一種帶熒光的物質,，可以與變性的神經元結合從而發(fā)綠色熒光，而正常神經元不會與FJB染液結合所以不發(fā)熒光,。

　　應用

　　FJB可以與變性神經元結合發(fā)出綠色熒光，從而可以標記神經組織內的變性壞死神經元,?？梢越璐搜芯坎煌幚矸椒▽ι窠浗M織的損傷。

　　染液配制

　　純水配成5mg/ml的濃縮液,，用時0.1%的冰醋酸做溶劑,，1:50-1:100稀釋

　　染色方法

　　1、石蠟切片脫蠟至水,。

　　2,、用現(xiàn)配的0.1%冰醋酸做溶劑，按1:50-1:100配制FJB的工作液,，混勻,，滴加到組織上室溫孵育20min;

　　3、純水沖洗,，DAPI染核,，再用PBS沖洗;

　　4、吹風機吹干,，二甲苯透明2min,，加一滴中性樹脂封片，晾干,。

　　染色結果

　　壞死神經元胞漿和胞核呈綠色熒光,，正常神經元無著色。神經元著色有時候伴隨著腦梗,，在梗死附近著色較明顯,。

　　注意事項

　　1、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要現(xiàn)配現(xiàn)用,。

　　2,、所有染色步驟完成后,，切片要自然晾干或用吹風機低檔吹干，然后透明,，樹膠封片,，因為已結合的FJB可溶于甘油，酒精,，所以不能直接用熒光封片劑封片,，也不能在酒精中做脫水處理。

　　3,、FJB與組織的結合可逆,，因此做完后要盡快鏡檢拍照，避免熒光淬滅,。

[免疫熒光/IF] - FJB染色

上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實驗,，樣本不僅含有基礎的動物組織切片，還包括植物葉片,、動物細胞,、骨片、腦片,、皮膚等特殊樣本,。染色種類多，染色方法全.石蠟染色,，冰切染色均可操作,同時還可以承接整體實驗項目,細胞實驗項目,包括樣本的造模,細胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細胞的增殖,、細胞粘附、細胞劃痕等實驗