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產(chǎn)品簡介
原位雜交（綠色熒光單標(biāo)），原位雜交原理：原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,，從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過程,。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。
詳細(xì)介紹
原位雜交（綠色熒光單標(biāo)）
一.項(xiàng)目介紹：
1. 原位雜交原理：原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,，從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過程,。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。
2. 所需器材：
脫水機(jī)G-JT12s,，包埋機(jī)G-L5/p5,病理切片機(jī)RM2016,，凍臺(tái)G-P1，烤箱GFL-70/230,組織攤片機(jī)G-KDP,，載玻片及蓋玻片,，正置熒光顯微鏡,，成像系統(tǒng)，恒溫箱,，高壓滅菌鍋,，移液槍，鐘擺搖床,。
3. 主要試劑：DEPC,。原位雜交固定液。PBS緩沖液,。20×SSC洗脫液,。蛋白酶K。DAPI,?？篃晒獯銣绶馄瑒ｋs交液,。
二.石蠟切片熒光探針原位雜交實(shí)驗(yàn)步驟
1,、組織固定：組織取出洗凈后立即放入固定液（DEPC水配制）中固定2-12h。
2,、脫水：組織固定完成后經(jīng)梯度酒精脫水后浸蠟,，包埋。
3,、切片：石蠟經(jīng)切片機(jī)切片,，攤片機(jī)撈片，62°烤箱烤片2h,。
4,、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-DEPC水洗。
5,、消化：根據(jù)組織固定時(shí)間長短,，切片于修復(fù)液中煮沸10-15分鐘，自然冷卻,。后基因筆畫圈,，根據(jù)不同組織不同指標(biāo)特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml) 37°消化 min,。純水沖洗后PBS洗3次×5min,。
6、預(yù)雜交：滴加預(yù)雜交液,，37°C孵育1h,。
7、雜交：傾去預(yù)雜交液，滴加含探針 雜交液, 濃度 ,，恒溫箱 度雜交過夜,。
8、雜交后洗滌：洗去雜交液,，2×SSC,，37°C 洗10min，1×SSC,，37°C洗2×5min，0.5×SSC室溫洗10min,。若非特異雜交體較多,，可以增加甲酰胺洗滌。
9,、DAPI復(fù)染核：切片滴加DAPI染液,，避光孵育8min，沖洗后滴加抗熒光淬滅封片劑封片,。
10.鏡檢拍照：切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像,。（紫外激發(fā)波長330-380nm，發(fā)射波長420nm,發(fā)藍(lán)光,；FAM(488)綠光激發(fā)波長465-495nm,，發(fā)射波長515-555 nm，發(fā)綠光,；CY3紅光激發(fā)波長510-560,，發(fā)射波長590nm，發(fā)紅光,。）DAPI染核,，為藍(lán)光。
注意事項(xiàng)：
1.mRNA為檢測對(duì)象時(shí),，需嚴(yán)格要求實(shí)驗(yàn)環(huán)境經(jīng)無RNA酶處理,。
2.FISH切片保存時(shí)間較短，應(yīng)盡快取圖,。
原位雜交（綠色熒光單標(biāo)）
上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實(shí)驗(yàn),，樣本不僅含有基礎(chǔ)的動(dòng)物組織切片，還包括植物葉片,、動(dòng)物細(xì)胞,、骨片、腦片,、皮膚等特殊樣本,。染色種類多，染色方法全.石蠟染色,，冰切染色均可操作,同時(shí)還可以承接整體實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,包括樣本的造模,細(xì)胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細(xì)胞的增殖,、細(xì)胞粘附,、細(xì)胞劃痕等實(shí)驗(yàn)