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產(chǎn)品簡介
免疫組化1,、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗,。
詳細介紹
石蠟切片免疫組化
實驗步驟
1、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗,。
2,、 抗原修復(fù)：組織切片置于盛滿EDTA抗原修復(fù)緩沖液（PH9.0）的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復(fù)，中火8min至沸,，?；?min保溫再轉(zhuǎn)中低火7min,，此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片,。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次,，每次5min。
3,、 阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片放入3%過氧化氫溶液（雙氧水：純水=1:9）,，室溫避光孵育25 min，將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次,，每次5min,。
4、 BSA或者血清封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈（防止抗體流走）,，在圈內(nèi)滴加用3%BSA或者10%正常兔血清均勻覆蓋組織,，室溫封閉30min。（一抗是山羊來源用10%正常兔血清封閉,，一抗其它來源的用3%BSA封閉）
5,、 加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,，切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜,。（濕盒內(nèi)加少量水防止抗體蒸發(fā)）
6、 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次,，每次5min,。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min,。
7,、 DAB顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min,。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下控制顯色時間，陽性為棕黃色,，自來水沖洗切片終止顯色,。
8、 復(fù)染細胞核：Harris蘇木素復(fù)染3min左右,，自來水洗,，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來水沖洗,，氨水返藍,，流水沖洗。
9、 脫水封片：將切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --無水乙醇Ⅰ6min -無水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脫水透明,，將切片從二甲苯拿出來稍晾干,，中性樹膠封片。
10,、 顯微鏡鏡檢,，圖像采集分析。
茁彩生物（zcibio）專注于各種生物制劑,、標準品,、API及化合物庫，總部位于中國上海,，分別在國內(nèi)各個省份設(shè)置代理商,。Zcibio經(jīng)過不斷努力已經(jīng)研究出更多產(chǎn)品，包括旗下的流式抗體,，分子生物學(xué)試劑,，以及WB輔助試劑， 產(chǎn)品涵蓋癌癥,、神經(jīng)科學(xué),、抗感染、表觀遺傳學(xué)等20個熱門研究領(lǐng)域,。同時zcibio還擴大了市場的外包服務(wù),，其中包括常用的HE然后，病例切片,，免疫組化以及TUNEL檢測,，項目超過20種不同類型的試驗，可滿足實驗室絕大多數(shù)的項目要求,。
