詳細(xì)介紹
高爾基染色(含多層染色)
一.實驗步驟
1,、取材固定:將老鼠殺死后,立刻取腦組織置于4%的多聚甲醛液中固定24h以上,。
2,、高爾基染色:用生理鹽水將腦組織輕輕漂洗幾遍,將需要的實驗部位切成2-3mm厚的腦組織塊,,高爾基染液將腦組織塊*浸沒,,放置陰涼通風(fēng)處避光處理14天,浸泡48h后,,換一次新染液,,之后每隔3天換一次新染液。
3,、組織塊脫水:將組織塊取出,,置于15%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水約1天,取出組織塊,,置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水2天,。
4、顯影:將組織塊取出,,蒸餾水洗1min,,濃氨水處理45min,蒸餾水洗1min,,定影液處理45min,,蒸餾水洗1min。
5,、脫水冰切封片:置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水2-3天,,冰凍切片100um,甘油明膠封片,,拍照保存結(jié)果,。
6、顯微鏡鏡檢,,圖像采集分析,。
二、結(jié)果判讀:
神經(jīng)元呈黑色,,膠質(zhì)細(xì)胞呈黑色,,背景灰色或者棕黃色。
三,、注意事項:
1,、染液配制的量需要根據(jù)實際情況來定,,配制過多易造成浪費。
2,、染液一定要避光保存,,并且實驗過程中的每一步操作都要求避光。
3,、染色完成后,,若客戶需要返還組織塊,將剩余組織塊放在30%的蔗糖中4℃避光運輸,。
上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實驗,,樣本不僅含有基礎(chǔ)的動物組織切片,還包括植物葉片,、動物細(xì)胞,、骨片、腦片,、皮膚等特殊樣本,。染色種類多,染色方法全.石蠟染色,,冰切染色均可操作,同時還可以承接整體實驗項目,細(xì)胞實驗項目,包括樣本的造模,細(xì)胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細(xì)胞的增殖,、細(xì)胞粘附、細(xì)胞劃痕等實驗.