詳細(xì)介紹
微生物(t-Pro)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
樣本類(lèi)型:血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清或其他生物樣本
檢測(cè)方法:雙抗夾心法
儲(chǔ)藏及保存:2-8度,6個(gè)月
檢測(cè)原理:
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,,制成固相載體,,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,,然后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體,,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),,計(jì)算樣品濃度,。
產(chǎn)品內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)所需儀器及設(shè)備:
實(shí)驗(yàn)操作流程:
第一步:試劑盒室溫平衡 30min ,然后從鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
第二步:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL。
第三步:樣本孔中加入待測(cè)樣本 50μL,;空白孔不加,。
第四步:除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
第五步:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置 1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板),。
第六步:每孔加入底物 A,、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min,。
第七步:每孔加入終止液 50μL,,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 O.D 值,。
注:
微生物(t-Pro)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷!